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小融科普 | IGF-1检测方法现状

融智生物
2022.11.04

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胰岛素样生长因子- 1 (insulin-like growth factor-1,IGF-1) ,又称为“促生长因子”,是一种在分子结构上与胰岛素类似的多肽蛋白物质。它的重要作用之一就是介导生长激素 (growth hormone,GH) 在外周靶器官组织的促生长效应。IGF-1主要由肝脏合成,循环中大部分IGF- 1与特异的结合蛋白结合,更为稳定。因此许多影响GH的因素,例如昼夜节律、垂体脉冲式释放、运动、急性营养不良或血糖急剧波动等,对IGF- 1的影响很小或无影响,故临床上常通过测定IGF- 1用于生长激素缺乏症、肢端肥大症的诊断及治疗监测等。

IGF-1的测定方法随着检验技术的不断进步而快速更新发展,目前主流方法是基于免疫学的方法,包括放射免疫法、酶联免疫(ELISA)法、化学发光免疫分析法等,质谱分析法是近几年发展起来的新检测方法。这些检测方法各有优缺点,需要结合检测目的进行择优选择。

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1.放射免疫法


放射免疫法基本原理是用放射性核素标记的抗原,与反应系统中未被标记的抗原竞争性结合固定量的特异性抗体,由于标记的抗原和特异性抗体的量均是固定的,因此反应参数与待测样本中的抗原量呈负相关。放射免疫法由于操作复杂、时间长、具有放射性污染等问题,逐渐被操作简单、快速、准确、可重复性较好的化学发光法取代。

2.化学发光免疫分析法


目前国内临床上主要使用化学发光免疫分析检测血清IGF-1水平,它是一种将化学发光和免疫分析结合起来的检测方法,用化学发光剂直接标记抗体,其实质是免疫分析, 只是反应的底物是发光剂该方既具有化学发光法的高灵敏度,又具有免疫分析法的高特异性,通过该方法建立的IGF-1参考值也得到了广泛应用但是化学发光免疫分析法发光过程短、本底较高仪器故障率较高试剂稳定性差检测精度不高,大大阻碍了其广泛应用。

3.ELISA法



ELISA法原理也是抗原抗体反应,基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记,适用于定性和半定量测定,该方法虽然试剂成本低、操作相对简单,但灵敏度较低,限制了其在临床的广泛应用。

4.质谱法



质谱分析法是近几年逐渐发展起来的一种临床检测方法。与免疫分析法不同,它可以解离出血清中的IGF-1,直接检测其分子质量,并通过标准曲线计算其含量,从而避免了抗体及结合蛋白等的干扰,灵敏度高, 检测结果更准确。目前已有多项研究证实质谱分析法与免疫分析法一致性良好,目前一般采用的是液相色谱-三重四极杆串联质谱,该方法对样品要求高、操作复杂、耗时较长, 限制了在临床中的推广应用。

表 IGF-1不同检测方法对比

方法原理优点缺点
放射免疫法间接检测法试剂成本低,灵敏度高操作复杂,存在放射性污染,有效期短
ELISA法间接检测法试剂成本低,操作简单灵敏度低,定性或半定量
化学发光免疫法间接检测法操作简单,成本低,灵敏度较高工作曲线随时间漂移
质谱法直接检测法灵敏度高,样品用量小样本要求高,操作复杂
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QuanPRO蛋白定量质谱解决方案

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 ( MALDI-TOF MS ) 如今已经诞生30多年,通过软电离技术与飞行时间质谱的结合,为生命科学领域提供了全新的分析方法。MALDI-TOF MS是原理和操作最简单的一类质谱,对样本要求较低,检测速度快,非常适合临床应用。

融智生物推出的拥有自主知识产权的新一代高通量、高灵敏度飞行时间质谱QuanPRO,更是引领MALDI-TOF技术进入“宽谱+定量”的新时代。融智生物基于QuanPRO飞行时间质谱,针对IGF-1检测开发了ABMSA富集定量检测方案,利用磁珠抗体富集体内微量的IGF-1,无需复杂的前处理过程即可进行质谱检测,完美结合了免疫方法操作的便利性和MALDI-TOF MS技术的高通量、高分辨率、高灵敏度、低成本等优点,适应临床检测需求。

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# 参考文献 #

[1]袁仙仙,阳洪波,朱惠娟,等. 胰岛素样生长因子-1测定方法及参考值范围[J]. 协和医学杂志,2020,11(4):7.

[2]河春姬, 申利. 三重四极杆液质联用技术建立检测血清中胰岛素样生长因子1的定量方法研究[J]. 中国运动医学杂志, 2021, 40(7):7.


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