5-羟甲基糠醛是许多国家判定蜂蜜品质的重要指标之一。世界各国对蜂蜜中的5-羟甲基糠醛作了限量规定,一般不得超过40mg/kg。我国国家标准GB/T 18796-2002、国家行业标准GH/T 1001-1998规定,合格级蜂蜜中5-羟甲基糠醛含量要求小于40mg/kg,优等级蜂蜜中5-羟甲基糠醛含量要求小于20mg/kg。
5-羟甲基糠醛是衡量蜂蜜新鲜度的一项重要指标,其含量越少,表明蜂蜜越新鲜。蜂蜜贮存和加工过程中温度越高,时间越长,产生的5-羟甲基糠醛就越多,它的含量高,标志蜂蜜贮存环境或加工工艺不合理,或者蜂蜜中有掺假。
5-蜂蜜只要有掺入2%人造糖浆,就会使5-羟甲基糠醛含量超过100毫克/千克,有掺人造糖浆进行造假的蜂蜜,则5-羟甲基糠醛的含量至少达1000毫克/千克以上。5-羟甲基糠醛含量在100毫克/千克以下的,属于纯蜂蜜自身所含单糖的自然转化,不影响蜂蜜质量。
■01 适用范围
适用于蜂蜜中5-羟甲基糠醛含量的测定。
参考标准:2020版中国药典一部中蜂蜜——5-羟甲基糠醛(高效液相色谱法)。
■02 色谱条件
色谱柱:月旭Ultimate® XB-C18(4.6×150mm,5μm)
流动相:乙腈/0.1%甲酸溶液=5/95
检测波长:254nm和284nm
柱温:30℃
流速:1.0ml/min
进样量:4μL
■03 谱图及数据
试剂空白:
对照品5-羟甲基糠醛溶液:
对照品5-羟甲基糠醛和鸟苷(内标物)溶液:
供试品溶液:
■04 结果与讨论
2020版中国药典要求鸟苷峰的理论塔板数不低于3000,蜂蜜中含5-羟甲基糠醛不得超过0.004%;而实测鸟苷峰的理论塔板数已经超过7000,实测该蜂蜜样品中5-羟甲基糠醛的含量为0.000002%。
■05 结论
5-羟甲基糠醛、鸟苷展现出良好的分离度、理论塔板数、对称因子、灵敏度和重现性。月旭Ultimate® XB-C18(4.6×150mm,5μm)很好地将5-羟甲基糠醛、鸟苷与其他未知物相互之间完全分开。
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