图
红花（ 图片源于网络，侵删）
红花别名红蓝花、刺红花，为菊科植物红花的干燥花，含有较多色素和挥发油类成分，这些成分极易污染GC-MS/MS色谱柱与衬管，从而导致分析时农残目标物峰拖尾、回收率变差、丢峰、保留时间漂移等问题。纳谱分析推出的HLB-C中药农残专用柱，特别适用于重色素和重油脂的中药材农残测定。
今天，我们来看看红花项目的前处理效果吧。
适用范围
本方法参考中国药典2020版2341第五法中的固相萃取法二，适用于含色素、挥发油类成分的中药材的农残检测。
实验步骤
一 / 对照品溶液的制备
1.1 混合对照品配制
精密量取禁用农药混合1 mL，置20 mL量瓶中，加乙腈稀释至刻度，摇匀，备用；
1.2 气相色谱-串联质谱法分析用内标溶液的制备
取磷酸三苯酯对照品适量，精密称定，加乙腈溶解并制成每1 mL含1.0 mg的溶液，即得。精密量取适量，加乙腈制成每1 mL含0.1 μg的溶液。
1.3 空白基质溶液的制备
取空白基质样品，同供试品溶液的制备方法处理制成空白基质溶液。
1.4 基质混合对照溶液的制备
分别精密量取空白基质溶液1.0 mL(6份），置氮吹仪上，40 °C 水浴浓缩至约0.6 mL，分别加入混合对照品溶液10 μL、20 μL、50 μL、100 μL、150 μL、200 μL，加乙腈稀释至1 mL，涡旋混匀，即得。
二 / 供试品溶液的制备
提取（直接提取法）：
精密称取5 g样品（3号筛），加氯化钠1 g，加入50 mL乙腈，匀浆处理2分钟，离心后分取上清液，残渣再加50 mL乙腈，匀浆处理1分钟，离心后，合并两次提取上清液，减压浓缩至3~5 mL左右，加乙腈定容至10 mL，摇匀，待净化。
三 / 净化
GC-MS/MS样品净化：
SPE柱：SelectCore HLB-C中药农残专用柱500mg/6mL
净化：取SelectCore HLB-C固相萃取柱500mg/6mL，加乙腈5 mL活化，再取红花提取液2 mL置已活化的SelectCore HLB-C固相萃取柱中，收集样品液，待所有样品液进入柱体填料后，取5 mL乙腈洗脱，合并样品液与洗脱液，氮吹至2 mL即得。
GC-MS/MS测定：
基质加标配制：精密量取上述氮吹后的样品溶液1 mL，氮吹至0.6 mL加入混合对照溶液，乙腈定容至1 mL，再加入0.3 mL磷酸三苯酯溶液，混匀，过0.22 μm尼龙针式过滤器，上机分析。
样品溶液配制：精密量取上述氮吹后的样品溶液1 mL加入0.3 mL磷酸三苯酯溶液，混匀，过0.22 μm尼龙针式过滤器，上机分析。
LC-MS/MS样品净化：
SPE柱：SelectCore HLB固相萃取柱200mg/6mL
净化：量取上述红花提取液3 mL，过SelectCore HLB固相萃取柱200mg/6mL，收集全部净化液，混匀，即得。
LC-MS/MS测定：
基质加标配制：精密量取过固相萃取柱后的溶液1 mL氮吹至0.6 mL加入混合对照品液，乙腈定容至1 mL，再加入0.3 mL水，混匀，过0.22 μm尼龙针式过滤器，上机分析。
样品溶液配制：精密量取过固相萃取柱后的溶液1 mL加入0.3 mL水，混匀，过0.22 μm尼龙针式过滤器，上机分析。
四 / 气相色谱-串联质谱法（岛津GC-MS-TQ8040 NX）
4.1 色谱条件
色谱柱：NanoChrom BP-50+MS,30m×0.25mm×0.25μm；
进样口温度：250 ℃
升温程序：初始温度为60 ℃，保持1 min；
以10 ℃/min升温至160 ℃；
再以2 ℃/min升温至230 ℃;
最后以15 ℃/min升温至300 ℃, 保持6 min；
载气：高纯氦气（纯度>99.999%）；
进样方式：不分流进样；
恒压模式：146 kPa；
进样量： 1 μL
4.2 质谱条件
电离方式：电子轰击电离源（EI）；
电离能量：70 Ev；
接口温度：250 ℃；
离子源温度：250 ℃；
监测方式：多反应监测模式（MRM）；
溶剂延迟：10.0 min
五 / 高效液相色谱-串联质谱法（岛津LC-MS 8045）
5.1 色谱条件
色谱柱：ChromCore C18-MS Pesticides中药农残专用柱2.6μm, 2.1×100mm;
流动相：
A：0.1%甲酸水溶液（含有5 mmol/L甲酸铵）
B：乙腈:0.1%甲酸水溶液（含有5 mmol/L甲酸铵）=95:5
流速：0.3 mL/min
柱温：40 ℃
进样量：2 µL
梯度：
时间
(min)
流速
(mL/min)
流动相A
(%)
流动相B
(%)
0
0.3
70301
0.3
703012
0.3
0
100
14
0.3
0
100
14.1
0.3
703016
0.3
7030
5.2 质谱条件
离子源：电喷雾离子源（Electrospray ionization，ESI）正离子扫描
监测方式：多反应监测模式（MRM）
离子源接口电压：4.5 kV
雾化气：氮气3.0 L/min
加热气：干燥空气10.0 L/min
DL温度：250 ℃
加热模块温度：400 ℃
接口温度：300 ℃
干燥气：N2 10 L/min
六 / 注意事项
GC-MS/MS：久效磷参考LC-MS/MS分析结果，内吸磷参考LC-MS/MS分析结果，水胺硫磷参考LC-MS/MS分析结果。
七 / 实验结果
红花基质加标GC-MS/MS部分化合物分析结果谱图
红花基质加标LC-MS/MS部分化合物分析结果谱图
表1 红花中33种农药残留的测定添加回收结果（%）
八 / 实验结论
通过以上实验数据可以看出，红花使用SelectCore HLB-C固相萃取柱处理对其色素类成分、挥发油吸附良好，有效地减轻了样品中色素和挥发油成分对GC-MS/MS柱前端的污染和基质中干扰物对目标物的影响；使用SelectCore HLB固相萃取柱处理的红花LC-MS/MS基质加标液中化合物出峰良好，搭配上述解决办法有效地解决了红花中农残分析中存在的问题，提高了实验效率，为红花的农药残留实验数据的稳定性和可靠性提供了良好的帮助。
中药农残相关实验耗材：
方法类别
推荐产品
货号
适用品种
快速样品
处理法
（QuEC-hERS）
SelectCore QuEChERS 萃取盐包
6g MgSO4, 1.5g NaOAc; 50/pkg
QS-002
川桐皮、川赤芍、木通、通草、灯心草、白芍、麦冬、泽泻、益智、姜黄、枸杞、大枣等含碳水化合物和少量色素类
SelectCore QuEChERS 净化管
15mL, 900mg MgSO4, 300mg PSA, 300mg C18, 300mg Silica, 90mg GCB; 50/pkg
Q-15PCSG01
注意事项：
前处理步骤较多，提取效率较为充分，溶液颜色较深，基质标每次只能一个点，加入盐包时会放热，注意冰浴降温
对杀虫脒有吸附，回收率可能偏低
SelectCore QuEChERS 净化管 15mL, Pesticide Residue A06(含色素挥发油中药农残Q法); 50/pkg
Q-15A06
木香、厚朴、羌活等含挥发油和色素类
注意事项：
改良后的配方可以吸附更多的色素和挥发油基质
SelectCore QuEChERS 净化管15mL, Pesticide Residue A07(丹参中药农残Q法); 50/pkg
Q-15A07
丹参专用
注意事项：
改良后的配方提高了丹参农残测定的稳定性和重现性
固相萃取方法1
SelectCore QuEChERS 净化管
15mL, 1200mg MgSO4, 300mg PSA, 100mg C18; 50/pkg
Q-15PC04
基质简单，色素较少如：人参、西洋参、茯苓、白芍、山药、隔山撬、浙贝母、麦冬、葛根、粉葛、川赤芍、赤芍、白附片、川木通、桑白皮、三七、黄芪、甘草、天花粉
注意事项：
适用于含有较多有机酸和糖干扰的样品，对磺隆类和杀虫脒化合物吸附较强
固相萃取方法2
SelectCore HLB固相萃取柱
200mg/6mL; 30/pkg
HLB060-060200-1
紫草、北柴胡、陈皮、山楂、大黄、柴胡、当归、党参、地黄、防风、黄芪、桔梗、苦参、益母草、黄精、灵芝、茯苓、大青叶、板蓝根、甘草等含少量色素类
注意事项：
吸附色素能力相比固相1要好，对滴滴滴类化合物吸附力较强故GC-MS/MS样品分析不适用，多用于LC-MS/MS样品净化
SelectCore HLB-A中药农残专用柱
200mg/6mL; 30/pkg
HLBA60-060200-1
千年健、桃仁、苦杏仁、花椒、没药、紫苏叶、厚朴、金银花、艾叶、款冬花、乌梅、桑叶、牛蒡子、菟丝子、酸枣仁、莪术、槟榔、小茴香、枳实、郁金、白头翁、菊花、陈皮、白花蛇舌草、褚实子、化橘红、川防风、当归等富含挥发油和色素类气质质测定项目
注意事项：
对磺隆类化合物吸附力强，且对三氯杀螨醇类、滴滴滴类化合物具有一定吸附作用，故LC-MS/MS样品分析不适用，GC-MS/MS样品分析需5mL样品上柱净化
SelectCore HLB-B中药农残专用柱
200mg/6mL; 30/pkg
HLBB60-060200-1
色素较多，挥发油较多如：火麻仁、菟丝子、厚朴、酸枣仁、羌活、川芎、莪术、蛇床子、紫苏叶、姜黄、干姜、陈皮、枳实、青皮s、防风、莱菔子、槟榔、当归、小茴香、豆蔻、黄连、黄柏、虎杖、大黄、马钱子、化橘红、当归
注意事项：
对滴滴滴类化合物具有一定吸附性，适用于LC-MS/MS样品分析，3mL样品上柱净化
SelectCore HLB-C中药农残专用柱
500mg/6mL; 30/pkg
HLBC60-060500-1
血竭、补骨脂、吴茱萸、花椒、姜黄、莪术、红花、连翘、青蒿、辛夷、香附、沉香、降香、檀香等富含挥发油、色素和生物碱类气质质测定项目
适用于重油重色素和生物碱的果实和种子类中药，GC-MS/MS样品分析需2mL样品上柱净化
固相萃取方法3
SelectCore GCB/NH2-II 固相萃取柱
500mg/500mg/6mL; 30/pkg
GN100-061000-2
色素含量多，含少量挥发油如：金银花、菊花、款冬花、忍冬花、益母草、淫羊藿、龙胆草、大黄、虎杖、何首乌、麻黄、苦丁茶、刘寄奴、山银花、忍冬藤、川牛膝、地黄、桑叶
注意事项：
洗脱液中有甲苯，毒性较大，且洗脱时间较长；
对磺隆类农药有一定吸附LC-MS/MS样品分析时应联合其他净化方式分析磺隆类数据
SelectCore GCB/NH2-A 固相萃取柱
500mg/500mg/6mL; 30/pkg
GNA100-061000-1
紫草、黄连、黄柏、何首乌、干益母草、吴茱萸、虎杖、大黄、决明子、胡黄连、苕叶细辛、菊花、千里光、蒲公英、艾叶、荆芥、茵陈、金银花、番泻叶、龙胆草、蛇床子、川乌、草乌、车前子、地耳草、金钱草、薄荷、广藿香、老鹳草、紫苏叶、忍冬藤、栀子、连翘、莲子心、竹叶柴胡、矮地茶、红景天、麻黄、白鲜皮、赶黄草、款冬花等
注意事项：
适用于干扰较为严重的GC-MS/MS样品分析。若用于LC-MS/MS样品分析，应联合其他净化方式
液相色谱柱
ChromCore C18-MS Pesticides 2.6μm, 2.1×100mm
货号：
S013-026018-02110S
气相色谱柱
NanoChrom BP-50+MS, 30m×0.25mm×0.25μm
货号：
G5025-3002
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