课程简介
在《“转化”成功的关键——感受态细胞的选择(上篇)》课程中,大家跟随Dr赛深入学习了什么是转化,以及在转化实验中困扰大家最多的感受态细胞选择问题,我们在选择感受态细胞时主要考虑三要素:基因型、转化效率和转化方法,相信大家已经掌握了基本的感受态细胞选择技能。
本期课程我们接着跟大家一起看下在大肠杆菌蛋白表达、重组杆粒的构建、Gateway克隆、慢病毒和逆转录病毒载体的克隆这些具体实验应用中分别应该选择哪款感受态细胞,帮助你少走弯路,成功拿下转化实验!
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课程框架
在更多的具体应用中,感受态细胞该如何选择:
原核蛋白表达系统
昆虫蛋白表达系统
克隆含不稳定插入片段的质粒
Gateway克隆
课程中解答的问题
· 原核表达中,种类繁多的BL21系列感受态细胞该如何选择?
· 构建用于昆虫表达系统的重组杆粒时,建议选择哪款感受态呢?
· 慢病毒和逆转录病毒载体在感受态细胞中易发生重组,那么它们在哪种感受态细胞中更稳定呢?
· Gateway克隆中的载体含有ccdB致死基因,对选择感受态细胞有什么影响呢?
以梦为马,享学启程
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