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MCAO线栓定义及使用注意事项

迈越生物MEYUE
2023.5.04

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线栓定义:

动物大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion, MCAO)模型是目前使用最为广泛的、研究局灶性脑缺血再灌注损伤的理想模型。目前,建立脑缺血再灌注模型的方法较多,其中线栓法因无需开颅、对全身影响小、缺血部位恒定、可准确控制缺血及再灌注时间的优点而被广泛采用。本品线径采用柔韧度非常好尼龙线、头部包包被环保无味无毒硅胶,经专业设备工装与显微操作,头端尺寸均匀、表面光滑圆润、易进入颅内又不至于刺破血管,并且可根据老鼠体重选择线栓规格试验;此产品提高模型制备的成功率、及脑缺血范围的稳定性

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注事事项:

1、分离时要层次清楚: 正中剪开SD大鼠颈部皮肤,分离皮下结缔组织时会发现该组织与颈部两侧鼓泡腺体(很多人误认为那是甲状腺) 结合紧密,因此不必分离过于太细,直接在正中两侧鼓泡腺体之间分离,这样能不接触胸锁乳突肌而直接暴露颈前颈群且不会损伤腺体造成过多出血。下一步是分开颈前肌群,这时候要注意用小钳子作撑开分离动作要在左右肌肉块之间而不是一块肌肉的肌纤维之间,虽然它们看起来很模糊,但这样能保证不会出现较多条索状细肌纤维条影响下一步颈内动脉的寻找与分离,并且能整块地向一侧牵开颈前肌群暴露颈动脉鞘。见到颈动脉鞘了则要注意细致分离迷走神经,若损伤则可能影响其呼吸而死亡的。

2、 分离血管时,要尽量将血管剥离的干净些,这样在用眼科剪剪口时就不会误剪外膜(误剪的话再剪就很容易把口剪大了或者剪断了,要注意口子越小越好插线),且要剪一个斜行的切口 (眼科剪与血管约成 45 ),这样在血液刚流出时仍能看上翻的断口管壁,这样即容易插入栓线且血管受得了插线时一定的牵拉。当然,切勿牵拉过猛,以免使血管发生痉挛,导致栓线不能顺利进入。

3、注意尽量不要损伤神经

4、 栓线进入后颈内动脉后即可逐渐插入了,有时候很顺利一插到底,但有时候在中间就怎么也进不去了,这是因为在血管入颅穿过颅骨时有一个狭窄或者角度。因此,碰上这种明显阻力时一定不能百盲目向前使力插,越插栓线前端变形越进不去且容易损伤血管。这时候正确的作法是往外抽出较多栓线,也许会有一定的动脉血流出,不必慌,只要顺着血管走行调整一下进线角度轻柔的使劲,一般都能进去,反复试几次还不行最好换根栓线,很可能前端也经变形角度变了! 颈内动脉的走向为内上方,可以用慑子夹住鱼线插,但进去后要注意,别太用力,要不血管就要破了。

5、 栓线不能在血管里反复进退,否则及容易造成蛛网膜下腔出血,而且很容易误解为模型成功,因为这时的神经功能改变也很明显,但并不是由于检塞引起的。

6、 进线时,使栓线有一定程度的弯曲,且只要保证栓线向屋顶方向弯曲,一般都能将线插如颅内。

7、术后一定要注意保暖

8、性激素对脑梗死面积有较大影响,应采用单一性别的动物进行实验

9、大鼠大脑中动脉永久性闭塞性缺血模型,梗死体积出现的最小时间点可能为2h,体积随时间进行性增大,至12h基本趋于稳定

10、 对于插线已经熟练的操作者来说,如果一次遇到大多数动物插不进线去或者死亡率特别高,就要考虑是否是动物的问题。动物往往出现血管变异,尤其是饲养很久的动物。动物来源对死亡率影响很大。

死亡原因:

1、首先要找出死亡原因,解剖死亡大鼠的脑,先看是否有蛛网膜下腔出血,如有出血,表明死因是插线太深,以后注意插线深度;如无出血,则还要再看是否有严重的半球水肿,如水肿严重,则表明死因是脑缺血时间太重,需要缩短缺血时间;如既无出血,又无明显的脑水肿,那就要注意动物状态或生活环境是否太差

2、动物死亡主要出现在手术后24h内,24h后动物死率明显下降。24h后亡的动物主要是由于动物难以进食进水饥饿而死。术后应加强护理。

3、手术后的动物非常脆弱,应放置在安静的环境中,避免给药时对动物产生过大的刺激,轻拿轻放。


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