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Nature Nanotechnology:荧光共振能量转移FRET | 前沿用户报道

HORIBA科学仪器事业部
2024.3.27

本文转载自公众号:今日新材料

荧光共振能量转移Fluorescence resonance energy transfer (FRET)报告子,通常用于核酸扩增测试的最后阶段,以指示核酸靶标的存在,其中荧光通过切割FRET报告子的核酸酶恢复。然而,在制造过程中,需要双重标记和纯化,从而导致了高成本的荧光共振能量转移FRET报告子。

近日,美国 得克萨斯大学奥斯汀分校(The University of Texas at Austin)Soonwoo Hong,Hsin-Chih Yeh等,在Nature Nanotechnology 上发文,报道了一种低成本的银纳米团簇报告子,并不依赖于FRET作为开/关切换机制,而是依赖于在核酸酶消化时,导致荧光颜色变化的团簇转化过程。

 在报告子切割时,还观察到90nm红移,这是通过简单供体猝灭剂 FRET 报告子无法实现的结果。电喷雾电离-质谱分析表明,银纳米团簇从 Ag13 到 Ag10 化学计量变化是主要原因,决定了报告子消化后观察到的发射颜色变化。

研究表明,DNA 模板化的银纳米簇探针,可为检测核酸酶活性的多功能报告子,并为核酸酶和金属 DNA 纳米材料之间的相互作用,提供了重要见解。

图1: Subak 报告子及其分段诱导颜色转换性质的示意图。

图2: 基于 Subak-1,DNA 酶 I 的定量化。

图3: 在 DNA 酶I消化前后,凝胶纯化 Subak-1报告子的解吸电喷雾电离质谱分析 electrospray ionization–mass spectrometry,ESI-MS 结果。

图4: Subak-1 和 Subak-2 的工作原理

(小注:Subak 在韩语中意思是西瓜 watermelon,第一作者语)

文献链接

Hong, S., Walker, J.N., Luong, A.T. et al. A non-FRET DNA reporter that changes fluorescence colour upon nuclease digestion. Nat. Nanotechnol. (2024).

https://doi.org/10.1038/s41565-024-01612-6

https://www.nature.com/articles/s41565-024-01612-6

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