ISO 20395:2019由国际标准化组织 IX-ISO 发布于 2019-08-08。
ISO 20395:2019在国际标准分类中归属于: 07.080 生物学、植物学、动物学。
本标准有等同采用的 中文版 GB/T 42077-2022 生物技术 核酸靶序列定量方法的性能评价要求 qPCR法和dPCR法
ISO 20395:2019 生物技术.核酸目标序列量化方法性能评估要求.qPCR和dPCR的最新版本是哪一版?
最新版本是 ISO 20395:2019 。
本文件提供了评估特定核酸序列(目标)定量方法的性能和确保其质量的通用要求。 本文件适用于使用数字 (dPCR) 或定量实时 PCR (qPCR) 扩增技术对 DNA(脱氧核糖核酸)和 RNA(核糖核酸)靶序列进行定量。 它适用于核酸分子中存在的靶序列,包括双链 DNA (dsDNA),例如基因组 DNA (gDNA) 和质粒 DNA、单链 DNA (ssDNA)、互补 DNA (cDNA) 和单链 RNA (ssRNA),包括核糖体 RNA (rRNA)、信使 RNA (mRNA) 和长短非编码 RNA [microRNA (miRNA) 和短干扰 RNA (siRNA)] 以及双链 RNA (dsRNA)。 本文件适用于源自生物来源的核酸,例如病毒、原核和真核细胞、无细胞生物液体(例如血浆或细胞培养基)或体外来源[例如寡核苷酸、合成基因构建体和体外转录(IVT)RNA ]。 本文件不适用于非常短的 DNA 寡核苷酸的定量(
,规定了核酸靶序列定量方法的性能评估和质量保证的通用要求。...
为了开展这一研究,你必须精确地测定基因组序列变异的拷贝数。实时定量PCR 可能需要运行多个重复,才能检测这种细微变异。 有时qPCR刚好符合要求 Sangamo在同时采用qPCR和dPCR,对于大部分应用,qPCR的表现不错。正如Lee所说的,两个系统都能测定样品中的DNA拷贝数。尽管dPCR直接测定绝对拷贝数,而qPCR依赖标准品,但两者不应有差异,除非到了qPCR的检测极限。...
除此之外,dPCR在病原微生物检测、microRNA研究、基因表达研究、NGS测序文库的绝对定量、表观遗传学直接相关的DNA甲基化定量检测、ChIP定量鉴定等领域的应用都令人极为期待,而在转基因成分鉴定、分子标准品精确定量、环境样本检测等具体的应用方向上,已经有大量实验数据和结果证明了dPCR技术的优良性能。...
痕量核酸检测的具体分类 dPCR尤其适合:对灵敏度要求非常高的核酸痕量分析研究;基质复杂样品中的核酸准确定量(如组织、体液、排泄物等样品)。 图10. 痕量核酸检测相关方法比较 6.1.1 癌症标志物稀有突变检测 在一份给定的样本中,相比于野生型DNA,癌症相关的突变序列比例较低,经常无法检测。而凭借其超高灵敏度,dPCR系统可以很容易地定量分析低至0.001%-0.0001%的突变频率。...
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