ASTM E2186-02a(2016)
使用彗星试验测定真核细胞中DNA单链损伤的标准指南
Standard Guide for Determining DNA Single-Strand Damage in Eukaryotic Cells Using the Comet Assay
- 标准号
- ASTM E2186-02a(2016)
- 发布
- 2002年
- 发布单位
- 美国材料与试验协会
- 替代标准
- ASTM E2186-02a(2023)
- 当前最新
- ASTM E2186-02a(2023)
- 引用标准
- ASTM E1706 ASTM E1847
- 适用范围
- 1.1 彗星测定可轻松用于收集 DNA 链断裂的数据 (9,25,26)。它是一种简单、快速且灵敏的方法，可以比较不同细胞群中的 DNA 链损伤。如本指南中所述，该测定有助于检测单个细胞中的 DNA 单链断裂和碱性不稳定位点，并可以确定它们相对于对照或参考细胞的丰度 (9,16,26)。该检测具有许多优点；测量单个细胞中 DNA 的损伤，只需采样极少量的细胞即可进行测定（<108201;000），该测定几乎可以在任何真核细胞类型上进行，并且已在比较研究是检测 DNA 损伤的非常灵敏的方法 (2, 27) 。
5.1.2 这些是一般准则。该测定有多种程序变体。使用的变化取决于所检查的细胞类型、感兴趣的 DNA 损伤类型以及进行检测的实验室的成像和分析能力。为了使 DNA 可视化，可以用荧光染料对其进行染色，或者为了进行光学显微镜分析，可以对 DNA 进行银染 (28)。本指南仅描述荧光染色方法。 DNA 迁移的显微测定可以使用目镜测微仪通过肉眼进行，也可以使用图像分析软件进行。可以使用校准的目镜测微计或根据迁移程度将细胞分为四到五类来进行肉眼评分 (29, 30)。图像分析系统由连接到荧光显微镜的 CCD 相机以及专门设计用于捕获和分析荧光染色细胞核图像的软件和硬件组成。使用这样的......
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