可见分光光度计原理

分光光度计是目前化验室中使用比较广泛的一种分析仪器，其测定原理是利用物质对光的选择性吸收特性，以较纯的单色光作为入射光，测定物质对光的吸收，从而确定溶液中物质的含量。其特点是灵敏度高；准确度高；测量范围广；在一定条件下，可同时测定水样中两种或两种以上的物质组分含量等。

分光光度计按其波长范围可分为可见分光光度计（工作范围360～800nm）、紫外-可见分光光度计（工作范围200～1000nm）和红外分光光度计（工作范围760～400000nm）等。

可见分光光度计的原理是，当一束单色光照射待测物质的溶液时，当某一定频率（或波长）的可见光所具有的能量（hf）恰好与待测物质分子中的价电子的能级差相适应（即ΔE=E2-E1=hf）时，待测物将对该频率（波长）的可见光产生选择性的吸收。用可见分光光度计可以测量和记录其吸收程度（吸光度）。由于在一定条件下，吸光度A与待测物质的浓度C及吸收地长度l的乘积成正比，即A＝KCL，所以，在测得吸光度A后，可采用标准曲线法、比较法以及标准加入法等方法进行定量分析。

可见分光光度计是一种结构简洁、使用方便的单光束分光光度计，基于样品对单色光的选择吸收特性可用于对样品进行定性和定量分析。其定量分析根据相对测量原理工作，即选定样品的溶剂(或空气)作为标准试样，设定其透射比为100%，被测样品的透射比则相对于标准试样(或空气)而得到，在一定的浓度范围，各参量遵循朗伯—比耳定律：A=lg1/T=KCL

T=I/I0

A:吸光度

T:相对于标准试样的透射比

I:光透过被测样品后照射到光电传感器上的强度I0:光透过标准试样后照射到光电传感器上的强度

K:样品溶液的比消光系数

L:样品溶液在光路中的长度

C:样品浓度

可见分光光度计广泛应用于医药卫生、临床检测、生物化学、石油化工、环保监测、食品生产和质量控制等部门作定性、定量分析，还可作为大、专院校和中学相关课程的教学演示和实验仪器。