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47例血细胞分析仪血小板计数假性减少原因分析

2018.8.12
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韩金龙

致力于为分析测试行业奉献终身

  血细胞分析仪具有高效、快捷、重复性好等优点,已被各家临床医院广泛应用,但应用中血小板计数时常出现假性血小板减少,令操作者真假难辨,相关报道甚少,本文就我院2006年中47例假性血小板减少原因分析如下: 
  1 对象与方法 
  1.1 研究对象 
  本院2006年门诊及住院患者中47例血小板假性减少者,男27例,女20例。末梢血标本17例, EDTA-K2抗凝静脉血标本30例。 
  1.2 仪器 
  美国库尔特HMX血细胞分析仪及配套试剂。日本希森美康KX-21血细胞分析仪及配套试剂。日本OLYMPUS显微镜及草酸铵法血小板稀释液。 
  1.3 方法 
  对47例假性血小板减少患者,根据全国血液学复检专家小组指定的复检标准,对于仪器计数血小板偏低、仪器有报警提示、散点图及直方图异常时,推片镜检血小板形态及分布情况;重新采血按《全国临床检验操作规程》第3版要求进行显微镜下草酸铵法血小板复检,计数3次取均值;末梢血预稀释后,EDTA-K2抗凝静脉血标本应放置室温30 min充分混匀后进行血细胞分析。 
  2 结果 
  10例患者的末梢血标本,经显微镜下草酸铵法血小板计数结果得以纠正,同时血涂片瑞氏染色后镜检观察血小板形态及分布未见异常。 
  7例末梢血标本,10例EDTA-K2抗凝静脉血标本经室温30 min后进行血细胞分析及草酸铵法血小板计数结果均得以纠正,血涂片瑞氏染色后镜检观察血小板形态及分布未见异常。 
  8例EDTA-K2抗凝静脉血标本经室温30 min后进行血细胞分析结果仍然减少,草酸铵法血小板计数结果得以纠正,血涂片瑞氏染色后镜检观察发现血小板大小不等聚集团块。 
  5例EDTA-K2抗凝静脉血标本经室温30 min后进行血细胞分析血小板计数结果仍然减少,草酸铵法血小板计数结果纠正,血涂片瑞氏染色后显微镜下观察发现“血小板卫星现象”。 
  7例EDTA-K2抗凝静脉血标本经室温30 min后进行血细胞分析结果仍然减少,草酸铵法血小板计数结果得以纠正,血涂片瑞氏染色后镜检观察发现巨大血小板体积。 
  3 讨论 
  10例末梢血标本假性血小板减少患者,多因穿刺组织损伤、组织凝血因子混入血标本中产生肉眼无法见到的凝块[1],是造成血细胞分析仪计数血小板假性减少的直接原因,对此类末梢血标本假性血小板减少患者,应该予以阅片,必须重新采血。 
  7例末梢血标本,10例EDTA-K2抗凝静脉血标本经室温30 min后进行血细胞分析得以纠正的患者,考虑血液离体后血小板产生可逆性聚集,使血小板计数结果偏低。末梢血标本经过预稀释随着与稀释液作用时间延长血小板均匀离散,抗凝静脉血标本中的EDTA-K2随着放置时间延长亦能使血小板逐渐离散[2],因此采取经室温放置30 min充分混匀后进行血细胞分析可避免血小板假性减少的发生[3]。 
  8例血涂片瑞氏染色后显微镜下观察发现血小板呈大小不等聚集团块。此类患者多见于肿瘤、自身免疫病、肺心病、晚期孕妇、肝病、毒血症等一些不明原因产生凝集素,使EDTA-K2抗凝血中血小板聚集呈大小不等团块,血细胞计数仪会把这些凝集团块当作白细胞来计数,这样血小板计数结果将假性减少,而白细胞数量增加;对于此类血小板减少一般仪器可有警报提示和散点图、直方图异常,库尔特HMX血细胞分析仪会在WBC结果后面做出[*R]提示,WBC散点图DF1、DF2图像下方血小板区细胞分布密度向右延伸[4],提示有血小板凝集的存在;希森美康KX-21血细胞分析仪会在WBC结果后面做出WL提示,WBC直方图上Ghost区和SCR之间的鉴别线与直方图交点抬高,提示有大颗粒存在。对此类患者采用草酸铵法血小板计数。 
  5例血涂片瑞氏染色后发现“血小板卫星现象”。“血小板卫星现象”是偶见于EDTA-K2抗凝血中,血小板黏附、围绕于中性粒细胞(或偶尔黏附于单核细胞)的现象,系EDTA和白细胞表面的IgG或Fc片段相互作用、非特异性结合血小板表面的GPⅡb/Ⅲs所致,虽与疾病和药物无关,这些黏附、围绕于中性粒细胞的血小板被误计为白细胞,造成血小板假性减少[5],由于“血小板卫星现象”造成血小板减少,可造成仪器对白细胞分类不确切,应采取草酸铵法血小板计数纠正,有文献报道用枸橼酸盐抗凝可消除此现象。 
  7例血涂片瑞氏染色后发现血小板体积偏大。这类患者多见于肿瘤、白血病、肝病。一般血细胞分析仪计数血小板阈值在2~30 fl,因此血小板体积大于30 fl时,超过仪器计数血小板阈值,不被纳入血小板计数范围,被误认为是小红细胞,因此是血小板计数结果偏低[6,7],对此库尔特HMX血细胞分析仪WBC散点图DF1、DF2图像下方血小板区细胞分布密度向右延伸[4],MPV值增高,PLT直方图底部分布较宽,提示有血小板凝集的存在;希森美康KX-21血细胞分析仪RBC结果后面出现RL、MPV值增高,PLT直方图底部分布较宽,鉴别线与直方图的交点抬高。此时应采用草酸胺法血小板计数纠正其结果。 
  综上所述,根据全国血液学复检专家小组制定的复检标准,对于仪器计数患者血小板偏低时,仪器有报警提示、散点图及直方图异常,应及时推片镜检及采取草酸胺法血小板计数纠正其结果,避免假性血小板减少现象发生,以提高检验结果的准确性。 

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