实验方法原理 | |
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实验材料 | |
试剂、试剂盒 | |
仪器、耗材 | |
实验步骤 | (1)-(5)与视神经横断模型及荧光金逆行标记相同,不再赘述。 (6)在眼球后极1mm处以显微剪剪断视神经。 (7)取自体大鼠一侧坐骨神经约1cm长,准备移植。 (8)采用11-0带针缝合线将坐骨神经缝合到眼球后极,然后将坐骨神经的缝合端套入视神经,使其包裹住视神经,周围垫以明胶海绵,防止视神经从坐骨神经内滑脱。 (9)将坐骨神经的另一端缝合到眼眶上缘。 (10)术毕缝合眼眶以及头皮,抗感染处理,调整头皮张力,可容双睑闭合。术中及术后观察手术侧眼底供血情况。 (11)在25d时,采用戊巴比妥钠麻醉动物,剪开头皮,找出缝合在眼眶上缘的坐骨神经,剪断末端。 (12)剪取小片封口膜并展蒲,戳一小孔,容坐骨神经通过,一小块明胶海绵浸吸5%荧光金溶液,包埋坐骨神经以逆行标记节细胞。将封口膜折叠包裹坐骨神经及明胶海绵。 (13)术后缝合头皮。 (14)3d后,注射过量戊巴比妥钠处死动物,取眼球进行视网膜铺片及全视网膜节细胞计数。 3视神经夹伤模型视神经夹伤模型在近年来被一些实验室采用,这里也一并进行介绍。 (1)-(5)与视神经横断模型极荧光金逆行标记实验相同。 (6)在眼球后极1.5mm处以5#摄子(Dumont)夹持10s。 (7)术毕缝合眼眶,以及头皮,调整头皮张力,可容双脸闭合。术中及术后观察手术侧眼底供血情况。 展开 |