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人毛细血管内皮细胞分离—偶联了抗PECAM抗体磁珠筛选细胞

2019.4.05
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zhaochenxu

致力于为分析测试行业奉献终身
试剂、试剂盒

PBS FCS

仪器、耗材

磁珠T25 板

实验步骤

1. 向“分离样品的制备”步骤10的细胞样品中加入 30 μl 偶联了抗 PECAM 抗体的磁珠。

2. 细胞和磁珠混合物冰上保温 15 分钟。

3. 磁体置于管侧 5 分钟，吸引筛选样品向磁体移动。小心吸弃上清，移开磁体。

4. 向磁珠中加 2 ml PBS/FCS，轻轻混匀，确保没有大的团块。用磁体重复筛选。

5. 重复步骤3和4三次。

6. 磁粒悬于 1 ml 接种培养基中。

7. 重悬细胞接种明胶包被的 T25 板，每 10 g 脂肪组织分离的细胞接种一块 T25 板。37℃ 振动培养。

8. 细胞长至足够密度时传代，在最初的两次传代中要应用筛选程序，确保内皮细胞纯度。

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