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菌株的构建和四分体孢子分析—在液体培养基中形成孢子

2019.4.08

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试剂、试剂盒	培养基
实验步骤	1）在合适的培养容器中，加入YPD培养基培养，待形成孢子的二倍体细胞生长至 OD₆₀₀为 2.5〜3.0 (约为 8×10⁷ 细胞/mL)。 2)转移1 mL培养液至一支无菌15 mL聚丙烯试管中，1200 g离心5 min。 3)倒去上清，用5 mL无菌水重悬细胞，涡旋振荡使细胞充分悬浮，再按步骤2离心。 4)倒去上清，细胞用1 mL添加了特定二倍体细胞所需营养成分的孢子形成液体培养基悬浮。 5）于30℃,350 r/min以上转速培养2〜3天，在显微镜下检査孢子的形成。如果酵母菌株难以诱导形成孢子，用YPA培养基预培养细胞。用乙酸作碳源时，酵母菌需要呼吸，而呼吸作用是孢子形成所必需的。展

试剂、试剂盒

实验步骤

1）在合适的培养容器中，加入YPD培养基培养，待形成孢子的二倍体细胞生长至 OD₆₀₀为 2.5〜3.0 (约为 8×10⁷ 细胞/mL)。

2)转移1 mL培养液至一支无菌15 mL聚丙烯试管中，1200 g离心5 min。

3)倒去上清，用5 mL无菌水重悬细胞，涡旋振荡使细胞充分悬浮，再按步骤2离心。

4)倒去上清，细胞用1 mL添加了特定二倍体细胞所需营养成分的孢子形成液体培养基悬浮。

5）于30℃,350 r/min以上转速培养2〜3天，在显微镜下检査孢子的形成。

如果酵母菌株难以诱导形成孢子，用YPA培养基预培养细胞。用乙酸作碳源时，酵母菌需要呼吸，而呼吸作用是孢子形成所必需的。

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