实验材料 | |
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试剂、试剂盒 | |
仪器、耗材 | |
实验步骤 | 1. 在18 mm×150 mm 无菌玻璃培养管或17 mm×100 mm 无菌聚丙烯酰胺管中用10 ml YPD培养基过夜培养酵母菌至静止期。
4. 细胞用200 μl 破菌缓沖液重悬,加0.3 g 玻璃珠(约200 μl 体积)及200 μl 酚/氯仿/异戊醇,高速振荡3 min。
5. 加200 μl TE缓冲液,快速振荡,高速离心5 min,室温下将水相转移到一个干净的离心管中,加1 ml 无水乙醇,颠倒混匀。
6. 室温下高速离心3 min,去上清,沉淀用0.4 ml TE缓冲液重悬。
7. 加30 μl 的1 mg/ml RNA酶A,混合,37℃温育5 min。
8. 加10 μl 4 mol/l 乙酸铵及1 ml 无水乙醇,颠倒混匀,室温下高速离心3 min,弃上清,干燥沉淀,DNA用100 μl TE缓冲液重悬。 展开 |