淀粉总脂肪测定方法

本标准参照采用国际标准ISO 3947-1977《淀粉总脂肪测定方法》。
1.主题内容与适用范围
本标准规定了溶剂抽提测定原淀粉、变性淀粉脂肪总含量的方法。
本标准适用于脂肪总含量低于1.5%(m/m)的淀粉样品。
2.术语
淀粉脂肪总含量:淀粉样品中脂肪的全部含量。以样品剩余物重量对样品原重量的重量百分比来表示。
3.原理
通过煮沸的盐酸水解样品后，冷却凝聚不溶解的物质。即包括全部脂肪，再过滤进行分离、干燥，并通过溶剂抽提出全部脂肪。干燥后得到样品的总脂肪剩余物重量。
4.试剂
在测定过程中，只可使用分析纯的试剂和蒸馏水。 4.1 溶剂:n-己烷或石油醚(沸点范围为0～60℃)或四氯化碳(这些溶剂有毒，小心使用）。
4.2 盐酸:ρ20为1.18g/mL。
4.3 碘:0.001mol/L溶液。
4.4 甲基橙:2g/L水溶液。
5.仪器
5.1 抽提器:如索氏抽提器。
5.2 抽提烧瓶:能密封连接抽提器(5.1)的下端。
5.3 圆盘过滤纸:孔径lOμm 。溶剂(4.1)中的可溶性物质能自由通过。
5.4 高效水冷式蛇型冷凝器:能密封连接抽提器(5.1)的上端。
5.5 电加热装置:有温度控制器。
5.6 水浴:温度在15～25℃。
5.7 沸水浴。
5.8 烘箱:温度能控制在50±1℃。
5.9 真空烘箱:温度能控制在100±1℃。
5.10 烧杯:容量为60OmL。
5.11 干燥器:内有有效充足的干燥剂和一个多孔金属厚板。
5.12 分析天平。
6.分析步骤
6.1 样品的准备
样品应进行充分的混合。
6.2 样品量
根据脂肪总含量的估计值，称取样品25-50g,精确至0.1g，倒入烧杯(5.10)并加入100mL水。
6.3 水解
用2OOmL水混合lOOmL盐酸(4.2），并把该溶液煮沸，然后加到样品液（6.2)中。
加热此混合液至沸腾并维持5min。
将此混合液滴几滴入试管，使之冷却至室温，再加入一滴碘液(4.3)，若无颜色出现，说明无淀粉存在，可按6.4所述进行。
若出现蓝色，须继续煮沸混合液，并用上述方法不断进行检查，直至确定混合液中不含淀粉为止。再按6.4所述进行。
6.4 分离凝聚物
将烧杯和内盛混合液置于水浴（5.6)中3Omin，不时地搅拌，以确保温度均匀，使脂肪析出。
用滤纸（5.3)过滤冷却后的混合液，再用几片干滤纸片将粘附于烧杯内壁脂肪取出，一起加到滤纸中，并将冲洗烧杯的水也倒入滤纸中进行过滤，确保定量。
在室温下用水冲洗被分离出的凝聚物和那几片滤纸。直至滤液对甲基橙指示剂(4.4）呈中性。
折叠含有凝聚物的滤纸和那几片滤纸，放在表面皿上在50±l℃的烘箱内烘3h。
6.5 脂肪的抽提
将已烘干的内含凝聚物的滤纸用新的一张滤纸包密闭，然后放入抽提器（5.1)中。
将约5OmL溶剂(4.1)倒入预先烘干并称重精确至0.001g的抽提烧瓶(5.2)内，烧瓶与抽提器密封相连。再将冷凝器（5.4)密封相连于抽提器上端，打开开关，使冷凝水进入冷凝器。
确保抽提器与其他各部紧密相连，以防止在抽提过程中溶剂的损失。
控制好温度，使每分钟能产升被冷凝溶剂150～200滴，或每小时虹吸循环7～10次，连续抽提3h。
拆下装有被抽提出的脂肪的烧瓶，将其浸入沸水浴（5.7)中，蒸出烧瓶内几乎全部的溶剂，然后将烧瓶放入真空烘箱（5.9)内lh，温度控制在100±1℃。再把烧瓶放入干燥器(5.11)内，使之冷却至室温，称重，精确至0.001g。
延长干燥抽提物的时间，会导致由于脂肪的氧化而得到偏高的结果。
6.6 测定次数
对同一样品吨（6.1)进行二次测定。
7.结果的表示
6.1 计算方法
脂肪总含量以样品剩余物重量对样品原重量的重量百分比表示，
X=[(m1-m2)/m0]×100
式中
X-样品总脂肪含量，%；
m0-样品的原重量，g；
m1-空抽提烧瓶的重量，g；
m2-抽提并干燥后抽提烧瓶和脂肪的总重量，g；
如允许差符合要求，取二次测定的算术平均值为结果。
结果保留二位小数。 7.2 允许差
分析人员同时或迅速连续进行二次测定，其结果之差的绝对值。该值应不超过平均结果的5%。
附加说明：
本标准由中华人民共和国商业部提出。
本标准由上海淀粉技术研究所负责起草。
本标准主要起草人：徐祖苗、徐志民、赵捷。