斑点滤膜结合法
实验方法原理 | |
---|---|
实验材料 | 待测蛋白质样品 |
试剂、试剂盒 | 10%三氯醋酸(TCA) 考马斯亮蓝凝胶染色液 考马斯亮蓝凝胶脱色液 |
仪器、耗材 | Whatman 3 MM 滤纸 |
实验步骤 |
1. 用铅笔在 3 mm 滤纸上画出 1 cm x 1 cm 大小的方格; 2. 在每一方格中心加入 3 ul 样品; 3. 将滤纸凉干,大约需要 15 min; 4. 将滤纸浸入 10% TCA 溶液中 30 s(TCA 溶液可重复使用); 5. 用水快速漂洗滤纸; 6. 将滤纸浸入考马斯亮蓝凝胶染液中 30 s(染液可重复使用); 7. 用水快速漂洗滤纸; 8. 在考马斯亮蓝凝胶脱色液中使滤纸脱色,脱色在几分钟之内完成; 9. 通过相应显蓝色的方格,可判断其含有一定量的蛋白质存在。
展开 |