基本方案
实验方法原理 |
丙酮酸合酶,丙酮酸:铁氧还原蛋白 2-氧化还原酶(乙酰-CoA 化) 丙酮酸 + CoA + 氧化型细胞色素 c ⇌ 乙酰-CoA + CO2 + 还原型细胞色素 c |
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实验材料 | 酶样品 |
试剂、试剂盒 | Tris-HCl 细胞色素 c 丙酮酸 CoA |
仪器、耗材 | 分光光度计 |
实验步骤 |
实验所需「试剂」具体见「其他」 0.98 ml 实验混合物 0.02 ml 酶样品 25℃ 时,于 550 nm 处吸收值增长。细胞色素 c 的吸收系数(还原-氧化) ε550=21×103 l/(mol·cm)。
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注意事项 | |
其他 |
试剂: 0.05 mol/L Tris-HCl,pH 7.3 0.01 mol/L 细胞色素 c(Mr=12380,620 mg 溶于 5 ml 水中) 0.10 mol/L 丙酮酸(丙酮酸钠,Mr=110.0;110 mg 溶于 10 ml 水中) 0.01 mol/L CoA(游离酸,Mr=767.7;CoA ·Li3,Mr=785.4;23 mg 溶于 3 ml 水中)
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