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方案22.2 染料摄取法测定细胞生存力实验

2019.10.20
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184****5725

致力于为分析测试行业奉献终身

           

实验方法原理 细胞悬液用碘化丙啶和二乙酰荧光素的混合液染色,用荧光显微镜或流式细胞仪检测。
实验步骤

材料

无菌

单细胞悬液
双醋酸荧光素,10ug/ml,溶于 HBSS
碘化丙啶,500ug/ml

非灭菌

荧光显微镜
滤光片
荧光素:激发 450/590 nm ,发射 LP 515 nm
碘化丙啶:激发 488nm ,发射 615 nm

操作步骤

1. 细胞悬液的制备与染料排斥法相同(见方案 22.1),但是生长液中不含酚红。
2. 以 1 : 10 的比例加入荧光素染料混合液,二乙酰荧光素的终浓度为 l ug/ml,碘化丙啶的终浓度为 50ug/ml。 :
3. 将细胞置于 37°C , 温育 10 min。
4. 将一滴细胞滴在载玻片上,盖上盖玻片,用荧光显微镜观察。

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