本质上,填料(固定相)不同,柱填料极性强,洗脱顺序弱,反相色谱柱的柱填料极性弱,洗脱顺序强以下是详细说明:
1.正相色谱的固定相通常是硅胶(silica)和其他具有极性官能团的结合相填料如(NH2,APS)和氰基(CN,CPS)。
由于硅胶表面硅羟基(SiOH)或其它极性基团的强极性,分离顺序是根据样品中各组分的极性,即弱极性组分先从柱上洗出。正相色谱中流动相的极性低于正己烷、氯仿、二氯甲烷等固定相。
2.将用于反相气相色谱法的填料用作硅胶基质,该表面与具有相对弱极性基团的粘结相粘结反相色谱的流动相极性强,通常是水、缓冲液、甲醇、乙腈等的混合物。样品流出柱的顺序是首先被冲洗出高极性组分,弱极性组分在柱上会有较强的保留。
常见的反向填料有:C18(ODS)、C8(MOS)、C4(丁基)、C6H5(苯基)等反相色谱可使中性化合物和极性化合物在色谱柱中分离。
适用于各种基质中多种性质化合物的测定和分离
保留时间可以用分子疏水性来描述和解释
高纯水、甲醇、乙腈等溶剂价格便宜、实用
选择性可以通过缓冲溶液来调节(离子强度和胶束粒径可以通过调节pH值来调节)以达到分离。