试验设计及受试物的特殊处理
1) 剂量设计 决定受试物最高剂量的原则是受试物对试验菌株的毒性和受试物的溶解度。对于纯的化学物质，一般最低剂量为每平皿0.2 μg，最高剂量为 5 mg，或溶解度允许，或饱和浓度，或对细菌产生最小毒性浓度。对于毒性很低、摄入量很大的定型产品，可根据其溶解度和对细菌的毒性采用可能的最大剂量。每 种受试物在允许最高剂量下设4个（含4个）以上剂量，每剂量间隔不超过5倍，每个剂量应做三个平皿。
2) 溶剂 溶剂可选用水、二甲基亚砜或其他溶剂（溶剂剂量应限定在毒性剂量以下。以二甲基亚砜为例，平板掺入法每皿不超过0.1mL 溶剂；预培养平板掺入法每皿不超过0.01mL 溶剂）， 无论选用什么溶剂均应无诱变性。
3) 对照组的设置 试验应同时设有阳性物对照组、溶剂对照组和未处理对照，均 包括加S9和不加S9两种情况。
4) 受试物的特殊处理 若遇特殊受试物作非常规处理时应在报告中说明。对以下几种情况可作如下处理：
a) 含组氨酸受试物：根据食品中测得的组氨酸含量若能诱发 回复突变率的增高可加设组氨酸平行对照组；或将检品经XAD-II树脂柱过滤洗脱预处理。
b) 食品包装材料及其制品成分：根据材料或制品的组成成 分，可分别采取过筛抽提、蒸发残渣等技术处理。
c) 挥发性受试物：可采用真空干燥器处理等方法。
d) 天然植物材料：可按植物化学方法制备粗制品或纯制品。
结果的判定
以直接计数培养基上长出回变菌落数的多少而定，如在背景生 长良好条件下，受试物组回变菌落数是溶剂对照回变菌落数的 两倍或两倍以上，并有剂量反应关系或至少某一测试点有可重 复的并有统计学意义的阳性反应，即可认为该受试物诱变试验 阳性。受试物经上述四个试验菌株测定后，只要有一个试验菌 株，无论在加S9或未加S9条件下为阳性，均可报告该受试物对 鼠伤寒沙门氏菌为致突变阳性。如果受试物经四个试验菌株检 测后，无论加S9和未加S9均为阴性，则可报告该受试物为致突 变阴性。
Ames 实验报道文献举例
广东省疾病预防控制中心通过 Ames 试验发现部分染发剂引起试验 菌株 TA97、TA98、TA100 回变率明显升高，提示部分染发类 产品具有致突变作用，可对健康产生危害。何冬梅等、中 国 卫 生检验杂志 2007,17,(11)。
人参与女贞子是临床上常见的有一定抗肿瘤效果的补益中药，在 Ames 试验中人参能抑制二氨基芴引起的 TA98 菌株回变菌落数的增加；女贞子能抑制叠氮钠引起的 TA100 菌株回变菌落数的增加，分别表现出抗移码型突变和抗碱基置换型突变的作用。倪娅等、中国保健 2009,17,(17)。生活饮用水经投加二氧化氯处理后对水中石油类污染物具有较 强的去除作用，可使水中有毒有害有致癌性的物质氧化降解为 毒性较小、无致癌作用的小分子物质，并且致突变活性明显降低，Ames 值由阳性转为阴性。高庆然等、工业用水与废水2001,6。
喹烯酮是我国自主研发的喹噁啉类一类新兽药，作为抗菌促生 长剂用于猪饲料中， Ames 试验表明喹烯酮对 TA97、TA98、 TA100 和 TA1537 加和不加 S9 在一定剂量下均为阳性。结果提 示，喹烯酮存在一定致突变毒性，应制定最高残留限量。张伟 等、毒理学杂志 2007,04。
Ames 试验表明煤和液化石油气（LPG）燃烧颗粒物均具有很强 的直接和间接致突变作用，主要致突变作用来源于硝基和胺基多环芳烃，两种颗粒物同时存在可加大致癌风险。闫洪涛等、 中国公共卫生 2007,04。
烷基酚聚氧乙烯醚（APES） 是一大类表面活性剂家族，广泛 用于家庭和工业的清洁产品，烷基酚类化合物是其降解产物， 其中对甲基苯酚、2,6-二甲基苯酚、4-乙基苯酚、4-辛基苯酚、对壬基苯酚、4-硝基苯酚、2-氯苯酚、1,3-二氯苯酚、2,4-二氯 苯酚、2,6-二氯苯酚、三氯苯酚和 2,3,5,6-四氯苯酚 12 种化合物 的 Ames 试验表明除 2,4- 二氯苯酚未诱发各菌株的阳性反应外，其余 11 种待测物均诱发了阳性反应,说明这 11 种苯酚类化 合物均具有致突变性。杨丽等、东北师大学报（自然科学版）2003,01。
重组葡糖激酶作为一种生物技术药物具有明显的溶栓和抗凝效果，Ames 实验结果显示重组葡糖激酶对试验菌株 TA97 、TA98、TA100 和 TA102 无诱发回变作用。刘永学等、癌变·畸变·突变 2004,9。
常见问题及原因分析
1、自发回变数显著低于标准 原因：a. 试剂盒保存条件不合适，菌株失活或营养成分降解；b.培养基配制操作过程中组氨酸、生物素添加量低；c.操作过程中添加菌液时顶层培养基温度过高；
2、自发回变数显著高于标准 原因：a. 培养基配制操作过程中组氨酸、生物素添加量高；b.培养皿经环氧乙烷消毒不彻底或环氧乙烷有残留；
3、阳性底物诱变菌落数偏离标准范围 原因：a. 阳性底物溶解不彻底或未充分混匀；b. 阳性底物添加量不准确；c. 试剂盒保存条件不合适或过期，阳性底物降解或 S9失活；d. 操作过程中添加菌液时顶层培养基温度过高；
4、待测物诱变菌落数非常低或没有菌落 原因：a. 待测物或待测物溶剂对细菌生长有毒性；b. 试剂盒保存条件不合适或过期，阳性底物降解或 S9 失活； c. 操作过程中添加菌液时顶层培养基温度过高；
5、菌落分布不均匀，集中偏向一侧。原因： 倒底层或顶层培养基时平皿未水平放置；
6、顶层或底层培养基凝固不充分或滑出平皿 原因：a. 顶层或底层培养基中琼脂粉含量低；b. 顶层培养基中加入的溶剂或待测物酸化，导致凝胶不充分；
7、如何判断 Ames 实验结果是否为假阳性 将经受试物和阳性对照物处理的 Ames 菌落进行增菌培养后接种于无组氨酸的培养基上,观察比较细菌的生长情况。如果经受试 物处理的菌株不能生长在无组氨酸的培养基中,而经阳性对照物处 理的菌株则可以生长在无组氨酸的培养基上,则说明经受试物处理 的菌株没有发生突变，试验中所观察到的菌落数增加是假阳性。
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