我们在1 ppb 到500 ppb 这一较宽的浓度范围内进行了定量校准。图4 展示了从所有的校准检测中得到的亚硝胺色谱峰。在所有情况下，NDMA 的峰形都是完全对称的，没有拖尾，而且无需任何手动修正就得到了非常可靠的峰面积积分值。图5 所示为用于样品定量的NDMA 校准曲线，曲线R2 大于0.99，可见线性极佳。本TSQ 8000 GCMS/MS 方法对所有亚硝胺都达到了相同水平的校准精度。
图 4. NDMA 从1 ppb ( 底部) 至 500 ppb ( 顶部) 的校准曲线测定结果
图 5. NMDA 从1 ppb 到500 ppb 的校准曲线
LOQ 测定
最低定量限（LOQ）和最低检出限（LOD）的计算都基于色谱峰的信噪比。LOQ 的计算基于的信噪比为10，LOD 基于的信噪比为3。
表2. 本方法LOQ 和LOD 的计算
结果确认
化合物确认是通过Thermo Scientific TraceFinderTM 定量分析软件提供的离子比检查功能实现的，该功能比较了用于定量的SRM 与定性SRM 的离子强度。覆盖1 ppb 到500ppb 浓度区间的标准品被进行了三次重复进样检测并用于计算离子比的精确度，结果显示在表3 中。虽然所有被检测的离子都处于低质量数范围并可能受到多种干扰，二级离子的离子比的精确度一直很好的保持在1-4%。
为了在样本分析中进行质量控制，在用TraceFinder 软件进行定量数据处理时，阳性结果都会通过离子比检查进行确认。对所有化合物来说，采集的两个二级离子的离子比例需保持在± 5%（10%） 范围内，符合从标准品得到的校准值。这为常规的样品检测提供了坚实的安全保障。表3 列出了所有本研究中涉及到的亚硝胺的平均离子比值。
样品检测
我们对多种样品进行了检测，包括空白样和添加了标准品的啤酒样品等。空白样的检测结果如表4 所示。该样品中检出的低浓度NDMA经计算发现低于校正曲线浓度，也低于LOQ。故在此LOQ 下，空白样品可以被确认为不含亚硝胺化合物。
另一个样品通过在啤酒中添加不同浓度的亚硝胺制备而成。所有的亚硝胺化合物都被检出，并在低浓度区间进行了定量，如表5 所示。每个用于定量的峰都通过了离子比质量控制，并且能够在这样的低浓度通过计算离子比对每个检测为阳性的化合物进行确认。
结论
通过本文描述的基于TSQ 8000 系统的GC-MS/MS 方法，所有研究涉及的亚硝胺化合物都能在食品安全控制所要求的低浓度被安全地检出并实现精确的定量。在定量校正曲线所用的最低浓度为1 ppb 的情况下，所有化合物的LOD 都低于1 ppb。TSQ 8000 GC-MS/MS 在1-500 ppb 的范围内显示出宽广的线性区间和优异的准确度。所有校正曲线的线性都非常好，R2 大于0.99。
TSQ 8000 GC-MS/MS 也显示出非常好的离子比稳定性，适用于阳性样品的确认。所有化合物的离子比，哪怕是在LOQ 浓度下，RSD% 都低于4%。基于GC-MS/MS 的亚硝胺检测方法的使用、建立，以及维护都很简单。哪怕是在分析新的未知物时，我们独有的AutoSRM 软件也能够自动找出并优化SRM 离子对和碰撞能。
基于本文所示的GC-MS/MS 方法，TSQ 8000 GC-MS/MS 能够准确可靠地测出真实样品中的亚硝胺含量。
本文所述的利用TSQ 8000 GC-MS/MS 进行食品中的亚硝胺检测的GC-MS/MS 方法可以直接用于常规的食品安全控制。本方法使用的标准GC-MS/MS 三重四极杆仪器也被广泛应用于常规食品安全控制的其他领域，例如杀虫剂、POPs，或多环芳烃。本方法检测迅速，能够支持高样品通量，并且提供的结果具有非常高的灵敏度和精确度。本方法使用常规的电子轰击源进行离子化并实现低浓度的亚硝胺定量，我们推荐将本方法作为前述使用液态CI试剂的化学离子化的离子阱方法的高产出的替代方案。
参考文献
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