BIOG粪便RNA提取试剂盒使用说明

试剂盒组成                   

产品介绍 

BIOG RNA Stool Kit是我公司研发团队专为从粪便中提取基因组RNA而设计，适用于不同来源的固态或液态粪便样本。BIOG RNA Stool Kit采用了最新的离子膜技术并反复优化了裂解液和洗脱液配方，提取得到的RNA纯度更高，最大限度地去除了蛋白、色素、脂类、杂质污染，可以直接应用于Northern 杂交、RT-PCR、Real Time RT-PCR、 cDNA 文库构建、体外翻译等各种常规分子生物学实验。

操作步骤：

请自行准备：无水乙醇、PBS、1.5mL离心管。
取出析出液和洗涤液，按以下操作：
a) 析出液：4.5mL加入25.5mL无水乙醇；9mL加入51mL无水乙醇。

b) 洗涤液：9mL加入21mL无水乙醇；18mL加入42mL无水乙醇。

c) 配制好的析出液如出现沉淀，可在37℃溶解，摇匀后使用。

取200mg的粪便于试管中(若粪便样本为液态，取200μL于试管中)，加入2mL PBS充分振荡混匀，300g离心5分钟，收集上清；取收集的上清液1mL于1.5mL离心管中，12000 rpm离心5分钟，弃上清后沉淀用1mL PBS重悬，振荡混匀后，12000 rpm离心5分钟，收集沉淀。

加入200μL裂解液Ⅰ，悬浮沉淀，37℃放置30分钟。

加入200 μL 裂解液Ⅱ，20μL消化液，充分振荡混匀，56℃水浴10 分钟。

加入600μL析出液，轻轻颠倒混匀，如有半透明悬浮物，不影响RNA的提取与后续实验。

将吸附柱放入收集管内，取上述溶液600μL转入吸附柱内，静置2 分钟，12,000 rpm 4℃离心1 分钟，弃收集管内废液。

将剩余400μL液体转入上述吸附柱内，重复操作步骤7。

将吸附柱放回收集管内，加500μL洗涤液至吸附柱内，12,000 rpm 4℃离心1 分钟，弃收集管内废液。

将吸附柱放回收集管内，12,000 rpm 4℃离心2 分钟，离去残留的洗涤液。

取出吸附柱，放入新的1.5 mL 离心管内，加入30-100 μL洗脱液，静置3分钟，12,000 rpm 4℃ 离心2分钟，收集RNA溶液。提取的RNA-70℃保存，或直接用于下一步实验。

注意事项：

1、析出液、洗涤液含有刺激性化学物质，操作过程请做好防护措施，避免直接接触皮肤，防止吸入口鼻。如不慎沾染皮肤或眼睛，请立
即用清水或生理盐水冲洗，必要时请就医。

2、裂解液如有白色絮状物析出属正常现象，置于37℃水浴中溶解即可。

储存、运输和有效期

本试剂盒可常温运输，室温（15-25℃）保存，有效期为12个月，消化液请于-20℃存放，避免反复冻融，裂解液Ⅰ请于4℃存放。

质量控制

本产品经严格的质量检验证明，无生物污染

注意 本产品仅用于科研