高压灭菌器是用比常压高的压力，把水的沸点升至100℃以上的高温，而进行液体或器具灭菌的一种高压容器。
高压蒸气灭菌方法的原理是水在大气中100℃左右沸腾，水蒸气压力增加，沸腾时温度将随之增加，因此，在密闭的高压蒸气灭菌器内，当压力表指示蒸气压力增加到15磅(1.05 kg/cm)时，温度则相当于121.3℃，在这种温度下20min即可完全杀死细菌的繁殖体及芽胞。在灭菌时，加足一次灭菌之用水于夹层中。用螺旋固定锅顶铁盖底部，使不漏气。加热，水沸后蒸气沿夹层上升。由洞入内筒，当蒸气初进入内筒时应把上下排气管打开，放出冷空气后，关闭排气管。由于蒸气通入密闭之空间，压力即上升，从压力表可以看出，蒸气还通过安全阀门，以保证压力维持于一定限度，使压力维持于15磅20 min，然后关闭热源，使压力逐渐降低至零，方可打开锅盖，否则因压力骤降，玻璃器内之液体会冲出瓶口，发生外溢或爆炸等危险。
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