免疫组化专题：流式细胞仪检测技术实验（二）

⑤主机设定：一般是已设定好的适合测定淋巴细胞的条件，包括探测器的电压。探测器的电压是调空光电倍增管所能检测荧光密度的范围。

⑥选择检测的波长和表达方式（plot）：如果用一种荧光抗体，一般选直方图（histogram）；如果用两种荧光抗体，常选点状二维图（dot plot）或轮廓线图（contour plot）表

 CD69分子表达检测直方图的数值说明
 

b.abti-CD3（2 ng/ml）检测结果
 

c.abti-CD3（10 ng/ml）检测结果
 

CD4及CD8细胞点状二维图结果
 

不同的荧光物要求选择不同的激发波长，参见下表
 

（2）细胞的吸入：将装有细胞的FACS测定管放置到机器吸管孔处。

先预检测样品，然后进行实际检测。可根据细胞的浓度选择测定的速度（低、中或高）。所有的数据将自动存入微机。

3.使用后的清洗  所有样品测定完后，要进行仪器的清洗。

（1）将装FACS清洁液的FACS管放置机器吸管孔，高速吸入1分钟。

（2）将装FACS洗净液的FACS管放置机器吸管孔，高速吸入 1分钟。

（3）再将装FACS清洁液的FACS管放置机器吸管孔，高速吸入5分钟。

（4）同样再将装FACS洗净液的FACS管放置机器吸管孔，高速吸入5分钟。

（5）最后将一装有双蒸水的FACS管放置机器吸管孔后，关闭机器。

（6）将废液槽中的废液倒掉，并清洗干净废液槽。