在生物药肽图分析、蛋白质修饰分析、蛋白质组学研究等诸多工作中，蛋白质的变性与酶解是样品处理的必经之路。RapiGestTM SF正是在这个实验步骤中，用以辅助蛋白酶解的变性试剂[1,2,3]。RapiGest SF有以下优点：
■ 综合水相、有机相溶液条件下，最高效的辅助酶解变性剂。
■ 作用过程中，不对蛋白造成副反应化学修饰。
■ 操作简单、全面适应液质分析方法。
■ 常规操作浓度对胰蛋白酶活性无抑制。
■ 可大大缩短酶解反应时间。
■ 对各种蛋白酶、肽-N糖苷酶等多种酶解过程都适用。
在蛋白质质谱分析的大部分工作中，常常需要将蛋白质酶解为多肽进行分析。但蛋白质结构是以三维结构的形式存在的，为了将蛋白高级结构内部的酶切位点暴露于蛋白酶的作用下，首先需要对蛋白进行变性，使蛋白舒展开。John R. Yates教授领导的团队对各种变性剂中的辅助酶切效果进行了充分比较，其中RapiGest SF的表现最为优秀（图1）[4]。仔细观察图1还可以发现，在实验结果中，较为常用的尿素辅助酶切效率较差。这是由于尿素对胰蛋白酶活性的抑制作用较大。实验人员有时会采取使用尿素进行蛋白后，将反映溶液稀释10倍，再加入胰蛋白酶的方法，以降低尿素浓度到1M以下，减少其对胰蛋白酶的抑制。但是，面对微量的生物蛋白样本，稀释后的体系，会大幅度降低样品浓度，限制了后续的分析工作。此外，尿素在对蛋白变性的过程中，还会对蛋白进行一定的化学修饰，如氨基甲酰化。副反应的发生对于多肽鉴定、组学水平蛋白定量会造成一定的影响与误差。而使用RapiGest SF无副反应的问题，正常使用浓度下(0.1%)对胰蛋白酶活
性也无影响（表1）。
图1. Tris水相缓冲体系下各种变性剂的辅助酶切效果比较。样品为mammalian cell lysate cytoplasmic fraction蛋白。
检测基于胰蛋白酶诱导N-α-苯甲酰-L-精氨酸乙基乙酯（BAEE）水解。将0.5微克胰蛋白酶加入1mL 50mM的碳酸氢铵溶液中（pH 7.9，0.2 mM BAEE）。检测△BAEE在253 nm下的吸收值（5分钟内的斜率）。
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