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RapiGest SF 试剂:促进溶液中蛋白酶解的有利工具(三)

2020.7.13
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

与其他的蛋白酶合用

我们测试了 RapiGest SF 与多种蛋白酶的适配性,如 Asp-N, Lys-C 与 Glu-C 。在酶解前使用 RapiGest SF 变性蛋白获得了有效的消解结果。

蛋白去糖基化的用途

RapiGest SF 也用于测试其它酶,如 PNGase F ,该酶用于酶切糖蛋白 N- 连接的糖基。 2 图 6 说明了去糖基化鸡蛋卵清蛋白。在 RapiGest SF 介质中 PNGase F 消解 2 小时后观察到了完全的去糖基化反应。

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结论

•  RapiGest SF 促进了蛋白酶解的速度与完全程度,能够得到蛋白药物序列覆盖率很高的肽图分析。

•  RapiGest SF 是适用于蛋白组学、糖蛋白与生物制药应用的领域

•  几乎无需消解后样品处理,简单样品酸化,足以从溶液中去除 RapiGest SF 。多种情况下 LC/MS 分析前只需简单稀释。

•  RapiGest SF 简化了样品制备方法,可提高分析通量;使用该方法提高实验室工作效率并提高数据质量。

参考文献

1. Yu YQ, Gilar M, Lee PJ, Bouvier ES, Gebler JC. Enzyme-friendly, mass spectrom- etry-compatible surfactant for in-solution enzymatic digestion of proteins. Anal.

Chem. 2003; 75: 6023-6028.

2. Yu YQ, Gilar M, Lee PJ, Bouvier ES, Gebler JC, A complete peptide mapping of membrane proteins: a novel surfactant aiding the enzymatic digestion of bacteriorhodopsin. Rapid Commun. Mass Spectrom. 2004; 18: 711-715.

3. Yu YQ, Gilar M, Kaska J, Gebler JC. A rapid sample preparation method for mass spectrometry characterization of N-linked glycans. Rapid Commun. Mass Spectrom. 2005; 19: 2331-2336.

4. Bailey MJ, Hooker AD, Adams CS, Zhang S, James DC. A platform for high- throughtput molecular characterization of recombinant monoclonal antibodies, J. Chrom. B. 2005; 826: 177-187.

5. Huang HZ, Nichols A, Liu DJ. Direct identification and quantification of aspartyl succinimide in an IgG2 mAb by RapiGest SF assisted digestion. Anal. Chem.

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