试剂、试剂盒 EDTADNA 酶ⅠDNA 酶Ⅰ缓冲液RNA 样品
仪器、耗材 水浴锅
实验步骤
一、材料
1. 缓冲液、溶液和试剂
用焦碳酸二乙酯（DEPC) 处理过的水
EDTA,25 mmol/L
2. 酶和酶缓冲液
DNA 酶Ⅰ, 扩增级（无 RNA 酶）
DNA 酶Ⅰ缓冲液，10X
3. 核酸和寡核苷酸
RNA 样品
4. 特殊设备
水浴，预设为 65°C
二、方法
①向一无 RNA 酶的管中加下列成分。
RNA 不多于 80ug
DNA 酶 I 缓冲液，10X 1ul
DNA 酶 I(lU/ul) 1ul
用 DEPC 处理过的水将总体积调到 10ul。
②室温下温育 15 min。
③加 1ul25 mmol/L 的 EDTA 溶液，并于 65°C 加热 10min 以灭活 DNA 酶 I。
用这种方式处理的样品适合直接用于 RT-RCR。
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