实验方法原理
气相色谱技术(gas chromatography,即 GC)是色谱技术的一种,其试验仪器气相色谱仪主要由载气系统、进样系统、色谱柱、检测器和记录仪或数据处理装置等组成,如图 1。
试剂、试剂盒 无菌水生理盐水
仪器、耗材 气相色谱仪进样系统的配件裂解炉氢离子火焰检测器不锈钢色谱柱离心机
实验步骤
1. 将菌株分别接种在琼脂营养斜面上,37℃ 培养 24 h,用接种环取下菌苔,切勿带有培养基,将菌苔放入盛有生理盐水的塑料小离心管中,1000 r/min 离心 5min,再用无菌水洗涤菌体三次,洗涤时的离心速度、时间都同前,只是最后一次离心10 min,弃去洗涤液,然后在电吹风气流下脱水 15 min,制成待鉴定的细菌样品。
2. 选择裂解色谱条件为:裂解温度 800℃,裂解时间 10 s,进样口温度 260℃,检测器温度 280 ℃,拄起始恒温 80℃ 恒温 4 min 后,6 ℃/min,氢气 45 ml/min,空气 450 ml/min,记录仪纸速 8 mm/min。
3. 待调试色谱仪运转正常后,取待鉴定的细菌样品 1.5 mg,置于裂解头铂舟内,然后插入裂解炉内,停留裂解 10 s,按上述选择的裂解条件进行试验,每个样品在色谱仪中分离时间为 25min。
每个样品的色谱鉴定,必须严格保持裂解色谱条件一致。
4. 从记录仪上取下记录有样品各个色谱峰的记录纸,或从数据处理机上取下记录有直接计算出的样品各个色谱峰分析结果的记录纸。