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依赖核酸序列的扩增技术简述

2021.5.12
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coco5517

认真做好每一件喜欢的事,把每一件要做的事都变成喜欢并认真去做的事

  该技术的检测反应有赖于AMV逆转录酶、噬菌体T7RNA多聚酶、核糖核酸酶H、两种特别设计的特异性寡核苷酸引物和分子信标探针共同协作而完成。

  NASBA全称是nucleic acid sequence-based amplification,即依赖核酸序列的扩增技术。 依赖核酸序列的扩增技术,是一种扩增RNA的新技术,是由一对引物介导的、连续均一的、体外特异核苷酸序列等温扩增的酶促反应过程。反应在42℃进行,可以在2h左右将模板RNA扩增约10^9~12倍,不需特殊的仪器。NASBA已经广泛应用于细菌、病毒等多种病原微生物的检测。

  该技术是由一对特异的引物介导的、三种酶催化的以单链RNA 为模板的恒温扩增技术,具有操作简单、特异性强、灵敏度高、不易被污染等优点,已广泛应用于病毒、细菌、霉菌、寄生虫和细胞因子等的检测,特别是用于艾滋病病毒、丙肝肝炎病毒等RNA 病毒的检测当中。在动物疫病预防控制方面, NASBA 方法已成为诊断禽流感病毒的国家诊断标准方法之一(GB/T19440-2004 禽流感病毒NASBA 检测方法)。同时,在植物病害防疫检查等方面也有重要用途。

  尽管RNA的扩增也可以使用反转录PCR技术(通过反转录形成单链DNA模板),但与NASBA相比,NASBA则有自己的优势:可以在相对恒温的条件下进行(一般恒温为41摄氏度)。该技术主要用于医学诊断,相对传统的PCR技术更为稳定、准确。

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