什么是诊断血清?
用于检测各种生物体抗原的含有特定凝集素的液体产品
用于血清学中研究生物组织以确定其具体血清分型 (主要用于流行病学目的)
它是如何制造的?
用特定生物体给健康兔子进行超免疫接种。收集产生的抗体，加热， 过滤 ，吸收，最后制成成品
诊断血清的种类
多价诊断血清包含几个不同的诊断血清抗体，并作为初次筛选使用
单价诊断血清 包含一种单一抗体并且经常在多价诊断血清缩小抗原选择范围后使用
混合诊断血清 包含所有的抗体. 例- 沙门菌属乳胶
如何进行血清分型?
玻片凝集法
试管凝集法
玻片凝集法
用甲醛生理盐水对机体组织进行悬浮沉降
在一张载玻片上滴上一滴诊断血清和一滴待检菌液
用铂丝混合2滴液体,轻摇载玻片，1分钟后观察凝集情况
有明显凝集出现即为阳性
试管凝集法
将培养液在37度环境下放置6-8 小时
用甲醛生理盐水稀释培养液
滴入.05ml 的诊断血清和.5ml 的稀释待检菌液到一个 12 x 75 的试管中
(2种方法始终保持在生理盐水的环境下，以监控自动凝集)
混合，在 52度下静置1小时.
检查凝集情况 (不要摇晃)
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沙门菌属分类
超过3000种的沙门菌属血清分型
3 种抗原
O- 体细胞 (细胞壁) 最先被发现确定
H- 鞭毛型
Vi- 荚膜型
考夫曼怀特沙门菌属诊断抗原表
O组抗原被编号为 1-67
血清群组A-Z代表整个沙门菌属群，以共享通用抗原为基础，超过51种
H组抗原被划分为 a-z + z1, z2 ect
Vi抗原是一种可能隐藏在O组和H组里的荚膜型抗原. 具有Vi抗原的沙门菌属不会在O型诊断血清里凝集
生研 以世卫组织合作中心的推荐为基础来参考和研究沙门菌属，不再使用以字母顺序排列的O组划分名称
“O”抗原的分类
玻片凝集法
先测定多价诊断血清
A-G (DK292484) or A-S(DK292476)
O多价 (DK211231) or O1多价 (DK211248)
用特定的单价诊断血清来测定 “O” 群组
测定“H” 抗原
试管凝集试验
使用沙门菌属参考手册-通常使用体细胞(O)抗原类别来测定鞭毛抗原
分类隔离-给予特定的 “H” 多价和/或 单价诊断血清
大多数沙门氏菌是双相的-所以将会有2个 “H”抗原需要测定-相诱导
相诱导法
如果只有一个 “H” 抗原被检测出来
必须诱导出隐性鞭毛抗原以识别第二个 “H”
滴入.1ml相诱导诊断血清 (对应特定的H抗原)到一个含有3ml 半液体培养基的试管中(在50ºC下加热溶解,避免煮沸起泡)
混合并且垂直地无菌放置在一个克雷吉管中
允许冷却 – 在克雷吉管中接种并且在37ºC下静置过夜
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相诱导法续...
有一个“隐性相”的细菌 (或者是第二相)
将迁移到该试管的外表面介质
移植到H肉汤等待6-8小时后重复第二个H诊断血清 (试管法) 来测定隐性抗原
注意事项
当H诊断血清含有叠氮化钠时不能用于相诱导
沙门氏菌的H血清在诱导期不含防腐剂，因此所有过程需要无菌操作。
Vi抗原检测
荚膜型抗原可能会伪装成体细胞抗原反应
如果所有的多价O型诊断血清测试为阴性则能与Vi诊断血清相区分
当在Vi诊断血清里得到一个阳性反应
将细胞悬浊液在100ºC下加热1小时，然后重复测定多价O型和Vi型.
如果O多价目前是阳性，Vi是阴性，那么这将会被视为S分型
如果O多价仍为阴性，Vi为阳性，则组织液可能不是沙门菌属并建议复验试验隔离
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