你好，提取总蛋白需要蛋白酶抑制剂和裂解液。一般是1：1进行配制。用的裂解液我们是RIPA。
将组织用液氮研磨碎了，然后按量加入裂解液，细胞量在10七次方左右是100微升。冰浴裂解20分钟（间断摇动）。然后4摄氏度离心12000rpm，15分钟。吸取上清定量。根据测定量的结果将各样品总蛋白量调匀，然后等体积加入loadingbuffer就可以电泳了。
你好，因为你最后取得是蛋白量，所以保证最终的总蛋白是相同的量就好了，组织只是提取的介质，我们定量的是最终的蛋白，而并非组织样品的蛋白含量。如果你想区分两种不同组织的蛋白含量是不同的，才会用到相同组织量。
在普通陶瓷研钵中就能进行，而且研钵可以不一次性使用。研钵处理的时候需要用锡纸包裹好，通过干热法灭菌，120℃烘箱。当然之前要洗干净。
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