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伏马毒素的快速分析技术的操作规范

2021.11.19
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zhaoqisun

致力于为分析测试行业奉献终身

       试验准

       (1)标定荧光计。

(2)配制甲醇/水(80:20 体积比)溶液(每周配制一次,或根据需要配制)。
(3)配制1倍 PBS 洗液缓冲液:取100mL 的10倍 PBS,加入到900mL 纯水中,即为1倍PBS缓冲液溶液。
(4)配制1倍 PBS/0.1%吐温-20洗液缓冲液:取100mL 的10倍浓缩液0.1%吐温 PBS 缓冲液,加入到 900mL 纯水中,即为1倍 PBS/0.1%吐温-20洗液缓冲液。
(5)配制 A+B 显色溶液(每5天配制一次):用微量移液器取20μL 的显色液B加入到显色液A瓶中。不用时,一定要将 A+B 显色溶液密封好,超过5天不能用。
(6)试剂空白试验(1mL甲醇+1mL A+B显色剂置于测试管中),荧光计读数应为0。

(7)缓冲液空白试验(2mL 1倍 PBS 缓冲液置于测试管中),荧光计读数应为0。

样品提取

(1)称取 50g 磨细的样品,5g 氯化钠,置于搅拌杯中。
(2)加入100mL 甲醇/水(80+20)溶液。
(3)盖上搅拌杯的盖子,高速搅拌1min。
(4)取下盖子,将提取物倒入折叠式滤纸上,滤液收集于干净的容器中。

提取物的稀释

(1)移取10.0mL 上步的滤液,置于干净的容器中。

(2)用40mL 1倍 PBS/0.1%吐温-20洗液缓冲液将滤液稀释,混匀。

(3)将上步稀释液通过玻璃微纤维滤纸(10m),滤液收集于玻璃注射器筒中,量取10mL。

分离柱色谱操作

(1)将上步10mL 滤液(4mL 相当于0.2g的样品),以1~2滴/秒的流速全部通过FumoniTest 亲和柱,直至空气进入到亲和柱中。

(2)将10mL 1倍 PBS/0.1%吐温-20洗液缓冲液以1~2滴/秒的流速通过亲和柱。

(3)将10mL1倍 PBS 缓冲液,以1~2滴/秒的流速通过亲和柱,直至空气进入到亲和柱中。

(4)用1.0mL HPLC 级的甲醇以1滴/秒的流速淋洗亲和柱,将所有样品淋洗液(1mL)收集于玻璃测试管中。

(5)将1.0mLA+B显色剂加到测试管的淋洗液中。混匀后,将测试管置于已标定好了的荧光计中。240s 后,读数。

检测限

0.25mg/kg,测定范围:0~10mg/kg。

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