药物鉴别试验的一般过程

1.外观

外观是指药物的聚集状态、晶型、色泽以及臭、味等性质。如药典对阿莫西林的描述为“本品为白色或类白色结晶性粉末;味微苦”。

2.溶解度

溶解度是药物的一种物理性质,可以在一定程度上反映药品的纯度。药典描述药品在不同溶剂中的溶解性能时,采用下列名词术语表示:

如盐酸苯海拉明“在水中极易溶解,在乙醇或三氯甲烷中易溶,在丙酮中略溶,在乙醚中极微溶解”。

3.物理常数

物理常数包括相对密度、馏程、熔点、凝点、比旋度、折射率、黏度、吸收系数和酸值等。纯净物的物理常数在一定条件下相对固定,所以测定物理常数不仅能够鉴别药品,还可以反映出药品的纯度,是评价药品质量的主要指标之一。

(1)熔点:是一种物质按规定方法测定,由固体熔化成液体的温度、熔融同时分解的温度,或在熔化时自初熔至全熔的温度范围,是多数固体有机药物的重要物理常数。药典收载有三种测定方法,其中最常用的是测定易粉碎固体药品的“第一法”,还有少数品种采用的第二法(测定不易粉碎的固体药品,如脂肪、脂肪酸、石蜡、羊毛脂等)和第三法(测定凡士林或其他类似物质),当药品项下未注明时,均指第一法。测定熔点要求记录初熔、终熔时的温度。如苯巴比妥的熔点为174.5~178℃,维生素C的熔点为190~192℃,熔融时同时分解。也可以经化学处理后,测反应生成物的熔点,如盐酸苯海索鉴别项下规定“取本品约0.1g,加微温的乙醇5mL溶解后,滴加氢氧化钠试液至遇石蕊试纸显碱性反应,析出的沉淀用乙醇重结晶,干燥后,依法测定,熔点为112～116℃”。

(2)比旋度:平面偏振光通过含有某些光学活性化合物的液体或溶液时,能引起旋光现象,使偏振光的平面向左或向右旋转,旋转的度数称为旋光度。偏振光透过长1dm且每1mL中含有旋光性物质1g溶液时,在一定波长与温度下测得的旋光度称为比旋度,比旋度是反映手性药物特性及其纯度的主要指标,可以用于区别药品、检查纯度或测定制剂的含量。

物质的比旋度与测定光源、测定波长、溶剂、浓度和温度等因素有关。因此,表示物质的比旋度时应注明测定条件。一般采用钠光谱的D线(589.3nm)测定旋光度,测定管长度为1dm,测定温度为20℃,用读数精确至0.01°并经过检定的旋光计,测定结果表示为。

如维生素C的比旋度测定:“取本品,精密称定,加水溶解并定量稀释制成每1mL中约含0.10g的溶液,依法测定,比旋度为+20.5°～+21.5°。”

比旋度的测定可用旋光仪,每次测定前应以溶剂做空白校正,测定后,再校正1次,以确定在测定时零点有无变动;如第2次校正时发现零点有变化,则应重新确定旋光度。配制溶液及测定时,均应调节温度至(20±0.5)℃(或各药品项下规定的温度)。供试品的液体或固体物质的溶液应不显浑浊或含有混悬的小粒,如有上述情形时,应预先滤过,并弃去初滤液。

(3)吸收系数:在给定波长、溶剂和温度等条件下,吸光物质在单位浓度、单位液层厚度时的吸收度称为吸收系数。药典规定的吸收系数表示方式为百分吸收系数,是指在一定波长下,溶液浓度为10g/L,厚度为1cm时的吸收度,用表示,它是吸光物质的重要物理常数,可用于考查原料药的质量应用外分光光度法测定制剂中该药物的含量。如头孢克洛的吸收系数测定方法为“取本品,精密称定,加水溶解并定量稀释制成每1mL中约含20μg的溶液,照紫外可见分光光度法,在264nm的波长处测定吸光度,吸收系数为230~255”。