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流动相比例的改变影响色谱结果：使用外力使含有样品的流动相（气体、液体）通过一固定于柱中或平板上、与流动相互不相溶的固定相表面。当流动相中携带的混合物流经固定相时，混合物中的各组分与固定相发生相互作用。
反相色谱法，一般是指在固定相的极性小于流动相，所述流动相的比例的增加是增加水和其他极性组分的比例，分离物质的弱极性固定相保留，增加了极性流动相洗脱力下降后，我们需要延长时间，洗出类似的东西相似相溶。
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