一、固定液
Carnoy固定液: 纯酒精60 ml
冰醋酸10ml氯仿30ml,也可以选用75%酒精.
二、液配制
1、过碘酸酒清夜配法:
过碘酸(HIO .2H O) 0.4g
95%酒精35ml
M/5醋酸钠(2.72g+蒸馏水100ml) 5ml蒸馏水10ml
保存于冰箱内,用棕色瓶,可用两周.
2、Schiff氏液:
0.5克碱性品红加入100毫升蒸馏水中,时时摇动三角瓶5分钟,使之充分溶解.冷却至50℃后过滤加入10毫升1N盐酸.冷却至25℃,加入0.5-1克偏重硫酸钠,在室温中至少静置24小时,然后密封冰箱保存.
3、Schiff氏酒精液配置
Schiff氏液 11.5ml
1N HCI 0.5ml
纯酒精 23ml
4、亚硫酸水 1%偏重亚硫酸钠10ml
1N HCI 10ml
蒸馏水 180ml的树胶溶解。
5、哈瑞或迈耶苏木精 略
三、染色步骤
1、石蜡切片脱蜡至水(细胞涂片,冰冻切片直接水洗)
2、蒸馏水洗
3、过碘酸酒清夜10min
4、自来水冲洗10min
5、Schiff氏液10min
6、流水冲洗5min
7、用哈瑞苏木精或迈耶苏木精染核3min(细胞核染色过深可用盐酸酒精分化)
8、流水冲洗5min
9、常规脱水、透明、封固
四、结果
PAS阳性为红色,细胞核蓝色。