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过碘酸希夫反应的方法介绍

2022.10.06
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coco5517

认真做好每一件喜欢的事,把每一件要做的事都变成喜欢并认真去做的事

  一、固定液

  Carnoy固定液: 纯酒精60 ml

   冰醋酸10ml氯仿30ml,也可以选用75%酒精.

  二、液配制

  1、过碘酸酒清夜配法:

  过碘酸(HIO .2H O) 0.4g

  95%酒精35ml

  M/5醋酸钠(2.72g+蒸馏水100ml) 5ml蒸馏水10ml

  保存于冰箱内,用棕色瓶,可用两周.

  2、Schiff氏液:

  0.5克碱性品红加入100毫升蒸馏水中,时时摇动三角瓶5分钟,使之充分溶解.冷却至50℃后过滤加入10毫升1N盐酸.冷却至25℃,加入0.5-1克偏重硫酸钠,在室温中至少静置24小时,然后密封冰箱保存.

  3、Schiff氏酒精液配置

  Schiff氏液 11.5ml

   1N HCI 0.5ml

   纯酒精 23ml

  4、亚硫酸水 1%偏重亚硫酸钠10ml

   1N HCI 10ml

   蒸馏水 180ml的树胶溶解。

  5、哈瑞或迈耶苏木精 略

  三、染色步骤

  1、石蜡切片脱蜡至水(细胞涂片,冰冻切片直接水洗)

  2、蒸馏水洗

  3、过碘酸酒清夜10min

  4、自来水冲洗10min

  5、Schiff氏液10min

  6、流水冲洗5min

  7、用哈瑞苏木精或迈耶苏木精染核3min(细胞核染色过深可用盐酸酒精分化)

  8、流水冲洗5min

  9、常规脱水、透明、封固

  四、结果

  PAS阳性为红色,细胞核蓝色。

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