关于军团菌的鉴定方法介绍

　　1. 细菌培养法

　　军团菌为革兰氏阴性杆菌，专性需氧，胞内寄生菌。军团菌最初是从以军团菌病人肺组织感染的豚鼠中分离出来的。这种方法虽然有较高的可靠性，但非常昂贵，而且费时费力，不久就被平板培养法所取代 [3] 。目前标准培养基为活性碳酵母浸膏琼脂平板，也称军团菌生长平板（BCYE）。接种在 BCYE 平板上的样品在温度为35-37ºC，培养10天，在浓度为2.5% CO2 的环境下培养更有利于军团菌的生长。军团菌的菌落通常呈白色、灰色、有荧光。军团菌在 BCYE 平板上生长而在平板和半光氨酸缺失 BCYE-Cys 平板上不生长。

　　2.血清学玻片凝集法

　　军团菌感染l周左右可检测出血清中军团菌特异性IgM抗体，2周左右可检测到特异性IgG抗体。

　　现已发现嗜肺军团菌有15个血清型。其中，嗜肺军团菌血清1型（Lp1）与人类疾病关系最密切，其次为血清4型（Lp4）和6型（Lp6）。

　　3.核酸扩增法

　　核酸扩增技术，即聚合酶链式反应（polymerase chainreaction，PCR），其基本原理是设计、合成两条寡核苷酸，作为引物，对应于待测病原微生物某一段特异性序列的两端，然后在体外模拟DNA体内复制的过程反复扩增，使靶序列放大上万倍甚至上百万倍而被检测出来。

　　常规PCR：鉴定标准是通过电泳来判断是否有扩增的核酸片段以及扩增产物的大小是否正确。

　　实时荧光PCR：通过对实时荧光PCR反应的每一个循环产物进行荧光信号的实时监测来判断分析。