1.患者一般取仰卧位，或根据病灶穿刺部位选取侧卧位或俯卧位。
2.先用普通探头扫查，初步确定穿刺点，用色笔做好皮肤标记。
3.对穿刺区域进行皮肤常规消毒。铺消毒巾，换用已消毒的穿刺探头。再次确定穿刺点和穿刺角度，将穿刺引导线对准穿刺取样目标，估测穿刺深度。
4.用1%利多卡因溶液5ml对皮肤、皮下、胸腹壁肌肉、胸膜或腹膜逐层浸润麻醉。
5.在局麻部位将带针芯的引导针刺入胸腹壁软组织（勿刺破胸膜或腹膜），然后重复用消毒探头及导向器瞄准穿刺目标，注意初步固定探头和导针穿刺方向。
6.取出导针针芯，通过导针插入穿刺针，穿刺针尖勿穿透胸腹膜。
7.当屏幕上目标显示最清晰时，嘱患者屏住呼吸，将超声引导线对准目标并充分固定探头与穿刺的角度。将穿刺针迅速推进，直至针尖强回声进入病灶或肿块边缘预定的穿刺位置。
8.手动负压抽吸，以肝穿刺为例。提拉配套活检针的针栓后，在患者屏气条件下，迅速将针推入肿块内2～3cm，停顿1～2s，然后旋转360°退针，将标本置入10%福尔马林溶液中固定，准备送病理检查。如此重复取材2～3次。
9.自动活检，以肝穿为例。将配以专用活检针的自动活检装置，在患者屏气条件下，迅速进针直至肿块边缘，立即掀按扳机，“枪响退针”。患者可以恢复自由呼吸。将标本置于10%福尔马林溶液中固定，准备送病理检查。如此重复取材2～3次（注：前列腺活检可能多达4～6次）。
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