照高效液相色谱法(通则0512)测定,临用新制。
溶剂
见有关物质项下。
供试品溶液
取本品适量,精密称定,置棕色量瓶中,加N,N-二甲基甲酰胺溶解并定量稀释制成每1mL中约含0.8mg的溶液,精密量取1mL,置10mL棕色量瓶中,用溶剂稀释至刻度,摇匀。
对照品溶液
取两性霉素B对照品适量,精密称定,置棕色量瓶中,加N,N-二甲基甲酰胺溶解并定量稀释制成每1mL中约含0.8mg的溶液,精密量取1mL,置10mL棕色量瓶中,用溶剂稀释至刻度,摇匀。
色谱条件
用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以乙腈磷酸溶液(pH1.00±0.05)(370:630)为流动相,流速为每分钟0.8mL,柱温为25°C,检测波长为383nm,进样体积10µL。
系统适用性要求
对照品溶液色谱图中,两性霉素B峰与相邻杂质峰间的分离度应符合要求。
测定法
精密量取供试品溶液与对照品溶液,分别注入液相色谱仪,记录色谱图。按外标法以峰面积计算。每1mg的C47H73NO17相当于1049两性霉素B单位。