1.分泌物的涂片检查
（1）用灭菌生理盐水洗净尿道口。
（2）戴消毒手套后，用手指由阴茎根部向尿道口方向挤出脓液，用接种环或棉拭子蘸取脓液，轻轻涂于载玻片上，待其自然干燥后加热固定，做革兰染色，然后镜检。
（3）在多形核白细胞内找到革兰阴性的肾形双球菌时，可明确诊断。
2.淋球菌的分离培养
（1）取材。
①男性患者从尿道取材时，可用细小棉拭子伸入尿道2～4cm，轻轻转动后取出分泌物（应略带黏膜）。
②女性患者取材时，先用阴道窥器暴露宫颈口，用无菌棉拭子拭去宫颈口表面的分泌物，另取一棉拭子插入宫颈口内1～2cm，转动并停留10～20s取出。
③直肠取材时，应将棉拭子插入肛门2～3cm。
④检查淋球菌性咽炎时，应从扁桃体及扁桃体窝取材。
⑤对青春期前女童可采集阴道处分泌物标本。
（2）标本取出后立即接种于培养基中，常用加入多黏菌素的血液琼脂或巧克力琼脂培养基。
（3）初次分离应使用5%～10%CO2烛缸，培养温度以36℃为宜，相对湿度80%以上，培养24～48h看结果。
（4）淋球菌在多黏菌素B血液琼脂上经24～48h培养后，可形成圆形、凸起、湿润、光滑、半透明或灰白色的菌落，边缘呈花瓣状，直径0.5～1.0cm，用接种环触之有黏性，如继续培养，菌落体积增大，表面粗糙，边缘皱缩。
3.淋球菌的鉴定——氧化酶试验
（1）配制氧化酶试剂：0.5%～1%盐酸二甲基对苯二胺水溶液。
（2）将溶液滴加于可疑菌落上，观察颜色变化。也可先将试剂滴在一小张滤纸片上，然后挑取可疑菌落与之接触，观察颜色变化。
（3）菌落在接触氧化酶试剂15～20s出现红色，保持30s以上，然后逐渐变成紫色，最后呈黑色，为氧化酶试验阳性，证实为淋球菌。
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