伏格列波糖的检查方法

碱度取本品1.0g,加水10ml使溶解,依法测定(通则0631),pH值应为9.8~10.4溶液的澄清度与颜色取本品1.0g,加水10ml使溶解,溶液应澄清无色有关物质照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液取本品适量,加流动相溶解并稀释制成每ml中约含1mg的溶液。对照溶液精密量取供试品溶液适量,用流动相定量稀释制成每1ml中约含1g的溶液。系统适用性溶液取伏格列波糖与杂质I对照品、杂质Ⅱ对照品、杂质Ⅲ对照品各适量,加流动相溶解并稀释制成每1ml中分别约含伏格列波糖1mg及杂质I、杂质Ⅱ杂质Ⅲ各10g的混合溶液灵敏度溶液精密量取对照溶液适量,用流动相定量释制成每1ml中约含0.1gg的溶液。色谱条件用多氨基键合聚乙烯醇为填充剂(sahipak Nh2P504E,4.6mm×250mm,5m或效能相当的色谱柱),以磷酸盐缓冲液(取二水合磷酸二氢钠1.56g与磷酸氢二钠3.58g,加水1000ml使溶解,用磷酸或氢氧化钠试液调节pH值至6.5)-乙腈(37:63)为流动相,调节色谱系统使主峰保留时间约为20分钟;用荧光检测器测定,激发波长为350nm,发射波长为430nm;取牛磺酸6.25g与高碘酸钠2.56g,加水溶解并稀释至1000ml,摇匀,作为荧光反应试剂,荧光反应试剂的流速与流动相相同;反应池温度为100℃,反应管长20m(内径0.5mm),冷却池温度为15~25℃,冷却管长2m(内径0.3mm)。进样体积50l系统适用性要求系统适用性溶液色谱图中,出峰顺序依次为伏格列波糖峰、杂质Ⅰ峰、杂质Ⅱ峰、杂质Ⅲ峰,相邻色谱峰之间的分离度均应符合要求;对照溶液色谱图中,理论板数按伏格列波糖峰计算不低于7000;灵敏度溶液色谱图中,伏格列波糖峰信噪比应不小于10测定法精密量取供试品溶液与对照溶液,分别注入液相色谱仪,记录色谱图至主成分峰保留时间的3倍。限度供试品溶液色谱图中如有杂质峰,杂质I、杂质Ⅱ、杂质Ⅲ的峰面积分别乘以校正因子2、2、2.5后均不得大于对照溶液主峰面积(0.1%),其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积(0.1%),各杂质峰面积的和按校正后的峰面积计算不得大于对照溶液主峰面积的2倍(0.2%),小于灵敏度溶液主峰面积的峰忽略不计。水分取本品,照水分测定法(通则0832第一法1)测定,含水分不得过0.5%炽灼残渣取本品1.0g,依法检查(通则0841),遗留残渣不得过0.1%。重金属取炽灼残渣项下遗留的残渣,依法检查(通则0821第二法),含重金属不得过百万分之十。