2019年9月13日，美国FDA发布公告称，多个品牌生产的雷尼替丁中含有低浓度的可能致癌物N-亚硝基二甲胺(NDMA)，该物质一般存在于水和食物中，在很低浓度时即可造成人体遗传物质的损伤，具有致癌、致突变的特点。NDMA分子量小，亲水性强，对检测方法要求更加严格。
雷尼替丁，强效组胺H2受体拮抗剂，主要用于胃酸过多、烧心等的治疗，也是目前比较主流的治疗溃疡病的药品。在雷尼替丁中检测出NDMA可能会对用药安全性产生较大威胁，因此在药物中准确监测NDMA非常重要。
针对此次“雷尼替丁”事件，迪马科技结合中国食品药品检定研究院发布的《关于开展雷尼替丁中N-亚硝基二甲胺检验工作的通知》及FDA10/17/2019公布最新检测方案，建立了超高效液相色谱串联三重四极杆质谱—盐酸雷尼替丁中NDMA的检测方法，本方法用于测定雷尼替丁药物产品和原料药中NDMA的含量，可供广大分析工作者参考。
以下为详细解决方案，敬请参考！
雷尼替丁中N-亚硝基二甲胺（NDMA）的检测 UPLC-MS/MS法
适用范围
本方案适用于盐酸雷尼替丁中N-亚硝基二甲胺（NDMA）的检测。
标准品配制
(1) N-亚硝基二甲胺（NDMA）储备液1.0 μg/mL：准确称取适量标准品，用甲醇配制成1.0 μg/mL的储备液；
(2) 对照品溶液2.0 ng/mL：吸取适量储备液，用水配制成2.0 ng/mL对照品溶液；
(3) 灵敏度溶液1.0 ng/mL：吸取适量储备液，用水配制成1.0 ng/mL灵敏度溶液；
样品制备
(1)盐酸雷尼替丁供试品溶液制备
取供试品约300 mg，精密称量于10 mL容量瓶中，用水定容至10 mL。
(2)盐酸雷尼替丁胶囊供试品溶液制备
取本品内容物适量（约相当于雷尼替丁300 mg）于15 mL离心管中，准确加入10 mL水，振荡40 min，6000 rpm离心2 min，取上清液过微孔滤膜后上机分析。
(3)盐酸雷尼替丁片供试品溶液制备
取本品5片，精密称量，研细，准确称取细粉适量（相当于雷尼替丁300 mg）于15 mL离心管中，加入10 mL水，振荡40 min，6000 rpm离心2 min，取上清液过微孔滤膜后上机分析。
分析条件
UPLC条件
色谱柱：Spursil C18,100 x 3.0 mm, 3.0 μm (Cat#：82022)
流 速：0.7 mL/min
进样量：10 μL
柱 温：30 ℃
流动相：A: 0.1%甲酸水 B: 0.1%甲酸甲醇
梯度设置
质谱条件
离子源：APCI源，正离子模式
检测方式：多反应监测
NC电流：3 μA
雾化气压力：50 psi
离子源温度：500 ℃
气帘气压力：20 psi
碰撞气CAD：8
定性离子对、定量离子对、碰撞气能量及去簇电压见下表
实验结果
(1)重复性实验结果
对照品溶液2.0 ng/mL重复进样6次结果如下
6针NDMA2.0 ng/mL的XIC对比图
(2)灵敏度实验
系统适用性灵敏度溶液1.0 ng/mL NDMA主峰信噪比＞3
NDMA1.0 ng/mLXIC图
(3)标准曲线
用纯水逐级稀释NDMA储备液，配制成1.0 ng/mL，2.0 ng/mL，5.0 ng/mL，10.0 ng/mL，50.0 ng/mL，100.0 ng/mL，500.0 ng/mL标准溶液。将标准溶液分别进样，以峰 面积对浓度做标准曲线，在线性范围内线性良好，相关系数0.9998。
(4)加标回收实验
取适量胶囊样品（约相当于雷尼替丁300 mg），加入适量NDMA标准溶液，按照盐酸雷尼替丁胶囊供试品溶液制备方法进行实验。
盐酸雷尼替丁胶囊中NDMA检测的添加回收结果（%）
(5)阳性样品实验
取适量样品（约相当于雷尼替丁300 mg），按照盐酸雷尼替丁胶囊供试品溶液制备方法进行实验。空白实验是样品不取，直接加入水振荡提取，然后上机。
盐酸雷尼替丁胶囊中NDMA检测结果
盐酸雷尼替丁胶囊中NDMA检测XIC图
(6)NDMA和雷尼替丁分离度验证实验
由于雷尼替丁保留较差，普通色谱柱上容易和NDMA共洗脱，把含有NDMA和雷尼替丁的混合标准溶液直接上机，本方法可将两个化合物完全分离。
NDMA和雷尼替丁混标TIC图
（RT1.51 NDMA ，RT2.86 雷尼替丁）
NDMA XIC图
雷尼替丁 XIC图
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