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难分离化合物新思路:Flash过柱纯化中使用两种不同溶剂体系进行纯化分离的案例分享

Biotage
2018.7.02

在有机合成以及药物化学领域,Flash系统,又名快速纯化系统,由于其高效快速的特点,而得Flash之名,在近几十年的有机合成以及药物化学的发展当中,加快研发速度,提高实验智能自动化水平,一直是科学家渴望改进和突破的方向,在此背景之下,Flash技术得到了迅猛发展,快速纯化系统经过一代又一代的迭代更新,目前已经在实验室研发当中扮演着不可或缺的角色;成千上万的Flash系统进入到了全球的有机合成以及药物化学领域的各个实验室,蓄力科研,加快研发。

Biotage致力于通过为制药,分析和过程开发提供完整的解决方案来加速药物研发和发展的过程,并在特定的细分应用领域确立自己的领导地位;作为全球的Flash系统领导品牌,Biotage拥有三十多年Flash制造和应用经验。

在实际Flash应用过程当中,我们也会遇到一些样品分离度很低,分离效果不好的情况,往往我们可以通过改变梯度方法,更换柱效更高的色谱柱的方法来实现样品的分离,此外我们还可以通过改变流动相的类型使得样品得到分离,由于Biotage Isolera 系统可以支持单次梯度方法中使用多种流动相体系,此次我们将与您分享在同一个梯度条件下使用两种不同溶剂体系从而达到样品分离的案例。

此样品有两个产物点,在PE:EA = 10:1的条件下,TLC点板信息如下图:

在紫外灯下,上下两个点有交叉,离得很近。在尝试了多种不同比例的流动相之后,发现样品仍旧有交叉,之后我们将流动相进行了修改,将流动相进行了修改,用二氯甲烷-石油醚的体系代替现有的乙酸乙酯-石油醚。

在PE:DCM = 10:1的条件下,TLC点板信息如下图:

可以发现,在DCM/PE的体系下,两个产物点分的很开,而下点的保留非常强,几乎没有产生任何的位置移动,于是我们打算在通过DCM/PE的体系将第一个样品洗脱下来后,更换流动相系统,使用EA/PE体系再将第二个产物点洗脱下来,由于Isolera系统支持在同一个梯度方法中使用多种溶剂体系,使得我们的设想的实现更加简单方便。

所使用系统型号为:Isolera One,如下图:

初始样品量大约4g左右,所使用的色谱柱为45g Rening柱:

在梯度方法设定中,我们设定了两种溶剂体系,如下图:

方法设定之后,我们进行了纯化操作,如我们设想的一样,第一个产物顺利在第一段的DCM/PE体系下洗脱出来,第二个产物在第二段的EA/PE体系下洗脱出来,所得实验结果报告如下:

从谱图可以发现,本身分离度很低的产物通过流动相的改变,得到了完全的分离;如您遇到类似产物点交叉的情况,不妨也通过改变流动相进行分离尝试。

在Biotage Isolera 系统的帮助下,4g粗产物的分离只需要不到半个小时,大大加快了实验速度,Biotage为您的实验效率保驾护航!

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