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通微课堂 | 液相色谱分离度下降原因分析

通微
2018.5.25

       在我们使用液相色谱分析样品,尤其是分析复杂样品时,有时会碰到如下情况,之前分离效果很好的几种物质突然出现分离度下降,分离效果变差的情况。分离度的下降对于我们的分离纯化或者样品的定量分析非常不利。而分离度又是色谱中表征两种化合物分离程度的一个参数。

分离度是什么?

       接下来我们具体了解一下影响色谱峰分离度的因素,影响分离度的因素主要有两类:

1

流动相污染或者变质

       流动相污染或者变质会引起保留时间发生变化,从而导致样品中各组分的保留时间发生变化,进而可能会导致各组分间的分离效果变差,即分离度的下降。其解决方案为重新配置新鲜的流动相。

2

保护柱或分析柱阻塞或污染

       若保护柱或分析柱阻塞或污染,可尝试去掉保护柱后进样分析,若分离度恢复,则可证明为保护柱阻塞或污染,此时可去掉保护柱进行分析,或者更换新的保护柱。

       若分析柱阻塞或污染,可尝试再生色谱柱(根据色谱柱种类和污染物的不同选择适当的再生程序)或者反冲色谱柱。若问题仍然存在,也可尝试更换色谱柱入口处的筛板或直接更换新的色谱柱。

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