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通微课堂︱高效液相色谱仪与蒸发光散射检测器联用(HPLC-ELSD)进样不出峰原因分析

通微
2017.5.25

高效液相色谱仪与蒸发光散射检测器联用(HPLC-ELSD)进行日常分析检测的过程中有时会碰到进样后不出峰的问题。导致进样不出峰的原因有很多,接下来我们了解一下常见原因及解决办法:

1

进样不出峰,色谱工作站基线波动正常

1)检查仪器工作状态是否正常:比如HPLC输液泵是否工作正常,包括流速、压力等是否正常;检查ELSD是否工作正常,包括ELSD参数是否正常,ELSD雾化管里面是否可以看到正常物化的气溶胶颗粒

2)检查流动相配制比例是否有问题

3)检查进样阀(自动进样器)是否工作正常

4)查看信号线是否接触不良,ELSD和工作站连接的信号线是否松动或接触不良

2

基线没有任何波动而呈现一条直线的状态

1)查看ELSD显示屏上的参数是否正常:如果信号值为一定值且保持不变,说明ELSD的输出信号可能已经达到饱和状态(此时对应的基线始终是一条直线),造成这种现象的原因可能是流动相或者色谱柱被污染,问题原因排查方法为:将HPLC输液泵停止10分钟左右,观察信号值是否能恢复到正常值波动,如果可以,则说明流动相或者色谱柱有问题,建议重新配置流动相或更换色谱柱

2)检查ELSD及色谱工作站相关接线是否接触良好:将ELSD后面的信号线拔出看看基线是否有变化(基线下降),如果基线依然为一条直线没有任何波动则可以判定为色谱采集盒出问题

3)漂移管进水:如果废液管堵塞造成废液排出不畅通导致废液进入到漂移管里面,此时也会出现基线特别平直,进样不出峰;解决办法是检查废液管确保废液能正常排出,然后断开色谱柱,关闭ELSD电源,将ELSD从背面轻轻抬高往前和桌面成45度角保持30秒左右,这样就可以将进入到漂移管的废液倒出来,最后接上色谱柱重新开机测试是否正常

4)激光器损坏:如果激光器不亮也会导致基线呈现一条直线的状态

5)光电倍增管损坏

3

基线不稳定波动大

1)检查ELSD的S值是否稳定:如果S值跳动比较大则可以说明是流动相或者色谱柱污染(S值跳动大对应的基线波动也会大),请更换流动相或者色谱柱

2)如果是使用普通的硅胶基质氨基色谱柱分析碳水化合物,由于氨基基团脱落也会造成S值偏高且波动大,此时基线会非常的不稳定;建议使用HILIC色谱柱或聚合物基质氨基柱替代硅胶基质氨基柱

3)ELSD的废气管必须保持自然通风,千万不可以将废气管伸入到带真空的排风系统里面(如吸力比较强的顶吸装置或者通风厨的出气口),此时也会造成ELSD的S值不稳定基线噪音变大。

4)检查ELSD的输出信号线及色谱工作站的相关信号线是否接触良好,连接是否正常

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