又一篇Nature! Wes检测人心脏活检样本蛋白质表达水平

射血分数保留的心衰（(HFpEF)

HFpEF是一种血流动力学状态，心脏不能满足机体的循环需求，或者以增加左心室充盈压为代价来满足这种需求，是一个日益严重的公共卫生问题，约占心力衰竭患者住院人数的一半。HFpEF的复杂临床表现源于多种共患病，包括肥胖、高血压和糖尿病。临床资料表明，全身炎症和一氧化氮(NO)水平的失衡对HFpEF的发展至关重要。然而，支持这些概念的明确的实验证据还没有被阐述，原因是临床前模型的局限性，未能概括HFpEF中发现的全部特征。因而基本的病理生理机制仍不清楚。

德克萨斯大学西南医学中心建立HFpEF临床前模型

德克萨斯大学西南医学中心心脏内科，联合约翰霍普金斯心脏内科科学家，在最新一期Nature报道了他们的临床前模型：A‘two-hit’mouse model of HFpEF，同时具备代谢和高血压应激。高脂饮食和使用Nω-硝基精氨酸甲酯(L-NAME)抑制组成型一氧化氮合成酶。一种未折叠的蛋白反应效应，即X盒结合蛋白1(XBP1s)的剪接形式，在此啮齿动物模型的心肌和HFpEF病人样本中的表达被降低。简单地说，XBP 1的减少是由于诱导型一氧化氮合酶(INOS)活性增加，肌醇的蛋白1α(IRE1α)的S-亚硝基化，XBP 1剪接缺陷。iNOS的药理或遗传抑制，或心肌细胞限制的XBP的过度表达，均能改善HFpEF的表型。基于此模型作者发现iNOS驱动的IREα-XBP1通路调控异常是HFpEF心肌细胞功能障碍的重要机制之一。

部分结果

two-hit mouse model of HFpEF建立

IRE1α–XBP1信号通路研究

注：小鼠样本使用传统western blot检测，但是珍贵的人心脏活检样本使用Wes

Capillary-based immunoassay：Capillary-based  immunoassay  was  performed  using the Wes-Simple Western method with the anti-rabbit detection  module (ProteinSimple).Protein expression was measured by chemiluminescence and quantified as area under the curve using the Compass for Simple Western program （ProteinSimple).  Proteins were detected with the following primary antibodies: p-IRE1α Ser724 (NB100-2323, Novus Biological);  IRE1α (3294, Cell Signaling Technology)。

本文中所有Western blot均提供全膜结果。和传统方法不同，Wes所有实验均为全膜结果，且不增加实验成本。

Wes系统三大特点

微量样本：已被广泛用于分选干细胞，胚胎发育，特定脑区，临床穿刺样本

全膜：所有实验全膜结果，且不增加抗体用量

定量：化学发光信号值定量

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