超高效液相进样器分为FTN与FL两类。H-Class与部分I-Class仪器使用FTN进样器,经典款UPLC和部分I-Class仪器使用FL进样器。
FTN全称为Flow Through Needle,即流路过针型。
FTN进样器流路图
平衡方法时,流动相由泵进入5号位,再从4号位流经进样针,再由进样底座至1号位,经6号位进入色谱柱,即5-4-1-6连通;吸取样品时,六通阀切换至5-6连通,流动相不经过进样针,直接进入色谱柱。待针吸取样品回到针座后,六通阀再切回过针状态,针内样品被流动相带入色谱柱。
当FTN超高效液相发生峰面积重现性差时,建议您先确认保留时间重现性。
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若保留时间稳定
峰面积重现性差的原因是定量不准。首先,样品量不应过满,防止瓶内负压导致吸样不准,一般建议样品占样品瓶的2/3。其次,保证清除溶剂充足的前提下,灌注注射器20-30个循环,确保注射器内无气泡。
注射器灌注图示
2
若保留时间不佳
当保留时间与峰面积重现性都差,甚至不出峰时,可先执行泵头渗漏测试(Leak Test)排除泵的影响,注意截止点选择“排放阀(Vent Valve)”。
泵渗漏测试图示
确认泵状态正常时保留时间不稳定,多数是针密封漏液导致(此时针内样品也可能一起漏出,导致峰面积差或不出峰)。此时可执行针密封准备状态测试(Needle Seal Readiness Test),若不通过表示针密封漏液。注意执行此测试,需要给系统一定的流速与压力。
针密封准备状态测试图示
Tips
1)针与底座内的针密封均属于易损易耗件,建议定期更换。
2)清洗溶剂要求可以溶解样品且不含盐,否则会在针外壁形成盐析,磨损针密封,缩短其寿命。
3)清除溶剂要求与流动相初始比例接近,否则可能会导致峰前延。
4)长时间不使用仪器,再次启用应充分灌注系统。
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