是最长情的告白
陪伴Ä爱纯派
GE小编
刚开学又可以放假过中秋，童鞋们是不是high起来了。虽然昨天预祝过一次，但是祝福不嫌多，GE小编祝各位中秋快乐，合家欢聚哦~
在这个很high的日子，小编也打算给大家推送一篇很high的，层析实验新玩法技巧！今天就让小编带大家来学习下，ÄKTA pure和ÄKTA avant的新玩法——两步层析吧。
GE小编
所谓自动化两步层析，是指初始样品上样后，经过全自动运行，直接得到经过两种层析柱纯化的样品。通常第一步为亲和层析或经过优化的离子交换层析，第二步为脱盐或凝胶过滤层析。
自动化两步层析优势
省时省力
无需手动操作即可完成两根层析柱的连续层析过程
安全
减少样品转移时间
避免人为失误
连续自动化运行可减少人为失误
GE小编
两步层析尤其适合样品种类较多、需要不止一步纯化且纯化流程类似的层析试验。
ÄKTA pure或ÄKTA avant可通过两种方法实现自动化两步层析：两步直接串联或通过样品环暂存样品。
两步直接串联
第一根层析柱洗脱的目的峰直接上样至第二根层析柱，典型应用：抗体纯化后直接进行pH中和。
运行流路如下：
系统准备：system wash
Column 2平衡：system pump-V9-V-Coulumn 2-UV-Out
Column 1平衡、上样和清洗：system pump-column 1-UV-Out
Column 1洗脱及Column 2上样：system pump-column 1-UV-V9-V-Column 2-V9-V-Out
Column 2洗脱：system pump-V9-V-Coulumn 2-UV-Out
通过样品环暂存样品
即在第一根层析柱和第二根层析柱之间配置样品环，将第一步洗脱的样品先暂存在样品环中，之后通过流路切换将样品环中的样品上样至第二根层析柱。典型应用：his标签蛋白纯化并去除咪唑。
运行流路如下：
系统准备：system wash
Column 1 平衡： system pump-column 1-UV-Waste
Column 1 上样： system pump- V9-M-column 1-UV-Waste
Column 1 洗脱（出峰之前）：system pump-column 1-UV-Waste
Column 1 洗脱（出峰过程）：system pump-column 1-UV-Out -V9-M-V9-inj-V9-L-Column 2-Waste
Column 1 洗脱（出峰结束）：system pump-column 1-UV-Waste
Column 2 平衡：system pump-column 2-UV-Waste
首页
