采用HILIC色谱柱TSKgel Amide-80测定甜菜碱的含量

甜菜碱（Betaine）是一种生物碱，天然存在于很多动植物体内。其分子内有3个有效甲基，作为甲基提供者参与合成蛋氨酸，在营养物质的代谢中起着十分重要的作用。甜菜碱在医药、化妆品、食品发酵和饲料工业等多个行业中都有广泛的应用。

本应用参照行业标准NY/T 2947-2016，按高效液相色谱法，采用亲水作用多孔硅胶色谱柱TSKgel Amide-80 (3 μm, 4.6 mm I.D. × 15 cm) 来测定甜菜碱的含量。分析结果表明，该色谱柱完全满足标准中对甜菜碱分离检测的要求。

样品稀释液：75% 乙腈-水溶液。

用样品稀释液将甜菜碱储备液 (2 mg/mL) 序列稀释得到浓度为0 μg/mL，20 μg/mL，50 μg/mL，100 μg/mL，200 μg/mL，500 μg/mL，1000 μg/mL，2000 μg/mL的标准工作液，依次由低到高进样检测。

色谱柱：TSKgel Amide-80 (3μm, 4.6mmI.D. ×15cm)

流动相：乙腈-水，梯度洗脱

流速：1.0 mL/min

柱温：30℃

紫外检测器：205 nm

进样量：10 μL

流动相梯度洗脱程序见下表：

图1.  甜菜碱2000 μg/mL检测图谱

图2.  甜菜碱标准曲线（标准方差=0.99997）