从丁二酸的双峰到溶剂效应的消除 ——ACD/Labs 微信群讨论纪实

单健的异构体的转换应该也是很快的，不确定是否是异构的原因

电离平衡是在微秒级，这么快的转换在色谱柱上是无法被分离的。

通常液相色谱出现双峰都是因为溶剂太强造成的。

我接触一些酸性化合物出双峰的情况，通常降低流动相pH值就解决了，我一直习惯用流动相直接做溶剂的。我一直觉得流动相pH值接近化合物pKa值，导致化合物一部分分子状态存在，一部分离子状态存在，才会出双峰。

离子态和分子态应该是一直在动态变化的，不会在柱子里面出现离子态就完全是离子态，分子态就完全是分子态单独出峰。

如果柱效低时，流动相做溶剂也还是有可能有纵向扩散，造成峰变宽，甚至双峰。

用离子交换色谱柱，一般方法非常稳健。

如果出现双峰，最简单的解决方案是降低进样体积，通过降低进样体积来降低溶剂效应。

难道没可能是两种稳定构象？

我觉得分子构相造成双峰不太可能，因为能够被色谱分离的双峰一定是两个稳定的异构体结构，如果是不稳定的结构，即，可以快速互相转换的结构，是不可能被色谱分离的，像丁二酸之类的结构，虽然是可以出现多个低能量的异构体，但是因为是通过单键旋转产生的，这些异构体是不稳定的。只有能够在色谱分离时间内可以稳定存在的两个结构，才可能被色谱分离。

对于构象异构，色谱上能否识别，在于极限构象异构体之间的活化能，若活化能在50千焦每摩尔，室温下相互转换非常快，色谱柱识别不出来。对于离子态和分子态，因为其活化能非常低，所以宏观表现是一个状态。

这种结构在核磁秒级别的采样时间都不足以观察的到两种构想，色谱更不可能。丁二酸是常用的saltforming agent，没发现过核磁上有双峰。

最简单的验证是否是溶剂效应造成双峰，就是改变进样体积，如果加大进样体积，双峰更加显著，降低进样体积，双峰现象降低，基本上就是溶剂效应。

C是错的，降低梯度初始有机相比例是有效改善溶剂效应的手段。初始有机相比例越低，对进样溶剂的稀释能力越强，因此耐受较高比例有机溶剂的进样溶液的能力越强。

升高未必有效，但降低也未必有效。

我做过很多，降低有机相比例降低溶剂效应的

降低梯度有机相比例就是通过增加保留来减少溶剂效应

我认为溶剂效应的机理是进柱子的一刻或者一段时间，有机相比例过高导致瞬时保留降低。所以这时任何增加洗脱强度的操作，都会加剧。