溶剂效应？
干扰？
过载？
？？
问题1
艾思吉老师，求助求助！>.<
你看我做的这个峰形也太丑了吧，咋整？
莫慌，莫慌。请详细说说。做的什么项目？样品溶剂是什么？初始流动相中有机相比例是什么？
我按照《化妆品安全技术规范》2022版征求意见稿中条件做的米诺地尔和坎利酮，这是10ppb混标的图，溶剂是90%乙腈水，初始流动相条件为5%有机相。
那可能是溶剂效应吧。
溶剂效应？什么是溶剂效应？怎么引起的溶剂效应？
溶
剂
效
应
目前公认的对溶剂效应的理解是样品溶剂洗脱强度大于流动相洗脱强度时产生的色谱峰变形的现象。比如100%纯乙腈溶解样品，注入流动相为乙腈-水（18：82）的反相系统中，会造成色谱峰分叉或前延的现象。但是这种概念不能解释其他由于所选稀释剂导致的峰变形现象。所以我们将溶剂效应的概念延伸，溶剂效应，就是由于样品中某些组分在样品溶剂与流动相所处的状态的较大差异导致的色谱行为表现异常的情况。
从你描述的情况（溶剂是90%乙腈水，初始流动相条件5%有机相）来看，样品溶剂的洗脱能力远远强于流动相洗脱能力，所以很可能是溶剂效应。
那我这个到底怎么处理呢？
您试试将样品溶剂换成50%乙腈水。
哇，可以了，好厉害。
额，等等，那我的样品提取溶剂依然是90%乙腈水，提取后过滤膜直接进样的，如果换成50%乙腈水，是不是会影响提取效率呀。
嗯，那这样的话，就不建议更换样品溶剂了。可以试试使用仪器上的Co-injection进样模式。
Co-injection 模式
此模式相较传统直接进样（标准模式）可以在不改变样品溶剂条件下去除溶剂效应，改善峰型，提高定量灵敏度。尤其当样品溶液为高比例有机溶剂时，可以直接进样分析而无需担心溶剂效应。
哇塞，Co-injection模式进样果然有效。这个方法不错，不用改样品溶剂，只需要在软件上简单设置就行了。十分感谢，帮我解决了大问题了。
溶剂效应解决办法
用流动相做样品溶剂或降低样品溶剂的洗脱能力。
使用仪器的在线稀释（Co-injection）功能。
降低进样量。
改变柱前管路规格：对于梯度洗脱而言，在不影响分离度的情况下，可以改用较粗内径的柱前管路。(注意：若是等度洗脱，此方法会降低柱效；若是梯度洗脱，基本不影响柱效)。
问题2
艾思吉老师，又bug了，我进1.5ppm，也就是这个方法中标曲的最高点，图谱是这样的。
看样子是过载了，先降低进样量试试。
于是，小仙女从之前的5μL，
尝试了2μL、1μL、0.5μL，
直到使用0.5μL，过载现象才消失。
1.5ppm混标，进样量0.5μL：
艾思吉老师，我进样量调到0.5uL才正常。
进样量相当于是原来的1/10。那您根据这个，调整下标曲的范围吧，原来的标曲是10ppb-1.5ppm，现在调整为1ppb-150ppb。先用150ppb试试是否过载，再用1ppb试一试灵敏度吧。
150ppb混标：
1ppb混标：
150ppb没有过载现象，峰形、分离度都不错；1ppb灵敏度也是可以的。
过载问题处理方法及步骤
1、先通过逐渐降低进样量的方式，大致确认峰饱和的最大浓度。
2、根据前面的实验，重新确认新的标曲范围。
3、确认新的标曲范围最高点是否过载，最低点灵敏度是否满足要求。
问题3
艾思吉老师，但是现在仔细看1ppb的图，感觉第3个目标峰峰形不太好，拖尾很严重。
1ppb混标放大图：
嗯，确实。这种情况下考虑有可能是目标峰出峰的地方可能有干扰峰影响了目标峰的峰形。您进一个空白溶剂，再进一个空针排查下是否有干扰峰，这样同时可以排查下干扰峰来自哪里。
空白溶剂：
空针：
enn……进空针也有干扰峰。是不是因为使用了Co-injection进样功能导致的呀，这样，您进一针不使用Co-injection功能的空针看看。
不使用Co-injection功能的空针：
看来和Co-injection功能没有关系。enn……，你看啊，干扰峰主要出现在梯度洗脱程序的后半部分，后半部分流动性中甲醇比例比较大，是不是流动相甲醇纯度不高导致的。这样，您把流动相甲醇换个不同的品牌试试。
更换甲醇后空针：
更换甲醇后1ppb混标：
更换甲醇后1ppb混标放大图：
哇塞，果然干扰峰少了很多，而且目标峰出峰位置的干扰没有了，最主要的是目标峰的峰形也恢复了正常。
排查干扰问题思路
1、逐步排查干扰的来源：可通过进空白溶剂、空针等方式，如使用仪器上特殊的功能，可采取不使用此功能对比排查；另外，还可排查流动相，分别排查水相、有机相等。
2、确认干扰的来源后，通过优化此部分，降低或消除干扰。
谢谢艾思吉老师，又是溶剂效应，又是过载，又是干扰的，这个项目遇到的问题可真不少啊。
不过在你的帮助下，都顺利解决了，也了解了以后遇到类似的问题如何排查、解决，真是太感谢了。
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